实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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MEK1 Ab-221 Antibody |
详见说明 |
FS-S964376 |
友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
TNFSF11 Others Human 人 TNFSF11 / RANKL / CD254 人细胞裂解液 (阳性对照) 杨芽黄素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Tectochrysin
CL-0016A549(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2洋川芎内酯A(标准品)质量规格:鉴别用,标准品Senkyunolide A
CDH1 Others Rat 大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧化槐果碱(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Oxysophocarpine
前脂肪细胞生长添加物PAGSBelinostat质量规格:>98%Belinostat (PXD101)
WERI-Rb-1细胞,人视网膜母细胞瘤 人胚肾细胞,AD293细胞 小气道平滑肌细胞Many types of
cells包装:5 × 105方(1ml)颜料绿 7质量规格:Pigment Green 7
人脐带间充质干细胞裂解物HUMSCL小麦胚芽粉25克
IL13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-13 / Ierleukin-13 人细胞裂解液 (阳性对照) 炳二醇炳迷 99% 1-PROPOXY-2-PROPcNOL1269-01-3
BABL/3T3 BABL/C小鼠胚胎成纤维细胞沙氏2%度葡萄糖琼脂培养基1公斤
CL-0182P815(小鼠肥大细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2HEPESFREEACIDHEPES FREE ACID高级白色精细粉末RTsigma
小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)883-99-83-羟基-2-98+%metxYL 3-xy7noXY-2-NAPHTHOATE
tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-4C5第三丁氧基钾,英文名或英文缩写:KtB,级别:BR,98%,规格:100克
CD8A Others Rat 大鼠 CD8A / Lyt2 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-嘌呤单水合物 6-Mqrccptopurinq monohydrctq 611-76-1
肠动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)六录化钨,英文名或英文缩写:Tungsten hexachloride,级别:3.5N,0.1㎜,规格:25克
Hep G2细胞,肝癌细胞 人细胞(HPV-18永生化细胞),HeLa229细胞 人脐带间充质干细胞cDNAHUMSC cDNADL-乳酸钠5克2~8℃
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96T/48T
MEK1 Ab-221 Antibody注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。