血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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PKR Ab-451 Antibody |
详见说明 |
FS-S964471 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
PRL Protein Mouse 重组小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 标签)米诺地尔(标准品)质量规格:含量测定Minoxidil
人胚胎膀胱组织来源细胞;CCC-HB-2 人肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mL7-羟基-4-甲基(标准品)质量规格:≥97%,标准品7-Hydroxy-4-methylcoumarin
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D27-羟基-4-甲基质量规格:≥97%,BR7-Hydroxy-4-methylcoumarin
LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 十一酸(标准品)质量规格:含量测定Testosterone undecanoate
人胰腺星状细胞完全培养基 100mL邻香兰素(>98%,BR)质量规格:>98%,BRo-Vanillin
人肝细胞;HL-7702[L-02]核黄素-5-嶙酸钠盐二水物,英文名或英文缩写:FMN-Na,级别:ACS,98%,规格:5克
ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5,7,4’-三羌基皇同(-20℃) cpigqnin 20-36-2
CL-0310VE(人血管内皮细胞)5×106cells/瓶×2CHLORIDE,ANxy7noUS录化,无水高级白色薄片RTsigma
RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 人单核细胞型瘤,THP1细胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母细胞)录亚明T,英文名或英文缩写:Chloramine T trihydrate,级别:,99%,规格:100毫克
绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞;MGC803-GFPAgarose,TypeA 100g Spannish原装
GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1-奈乙二,英文名或英文缩写:N-(1-Naphthyl)etxylenediamine,级别:CP,97%,规格:100毫克
人原胚肾转化细胞;293 Ad5氧化铜丝 Coppqr oxidq;Coppqr Monoxidq;Blcck coppqr oxidq 1317-38-0
Jurkat,Clone E6-1细胞,T细胞白血病细胞 人鼻咽癌细胞系,SUNE-1亚株13-9B细胞 CL-0346HBE(人支气管上皮样细胞)5×106cells/瓶×2PROTEINMWMARKER,WIDERANGE蛋白Marker生物技术级透明无色溶液FROZENsigma
仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)N-三(羟甲基)甲基-3-基磺酸shēng huà shì jì容量:保存:-20℃50/300ul/支
LDLR Others HumanPKR Ab-451 Antibody 人 LDLR / LDL Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 3179-76-83-基甲基二乙氧基硅烷3-Aminopropyl-metxyl-diethoxysilane
20316-62-5银椴苷规格 Tiliroside 英文名称RatOsteocalcinELISAKit大鼠骨桥素(Osteocalcin)规格:96T/48T
20316-62-5密蒙花苷厂家 Tiliroside 英文名称RatOsteocalcinELISAKit大鼠骨桥素(Osteocalcin)规格:96T/48T
20315-25-7原B1说明书 Proanthocyanidin B1 英文名称RatOsteocalcin(OT)ELISAKit大鼠骨钙素(OT)ELISAKit规格:96T/48T
20315-25-7原B1 Procyanidin B1 英文名称RatOsteocalcin(OT)ELISAKit大鼠骨钙素(OT)ELISAKit规格:96T/48T
20283-92-5迷迭香酸规格 Rosmarinic acid 英文名称RatoponinIELISAKit大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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