实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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AKT1/AKT2/AKT3 Ab-315/316/312 Antibody |
详见说明 |
FS-S964557 |
友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
MDA-MB-415 人腺癌细胞黄藤素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Palmatine
HFL1人胚肺成纤维细胞 HFL1 in human embryo lung fibroblasts F12K培养基+10%FBS盐酸西那卡塞;盐酸甲状旁腺激素质量规格:>99%,BRCinacalcet HCl,AMG073
SCGB1A1 Protein Mouse 重组小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 标签)黄藤素质量规格:≥97%,BRPalmatine
人胚肾二倍体细胞;CCC-HEK-1 人气管上皮细胞完全培养基 100mL链霉蛋白酶/链丝菌蛋白酶/链霉菌蛋白酶质量规格:BR,4000u/mg,进分Pronase E
小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14粉防己碱;汉防己甲素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Tetrandrine
RN-c, 大鼠皮质神经元碱性氧化铝1公斤
人胚胎心脏成纤维样细胞;HEH2 人成纤维细胞完全培养基 100mL胆减氧化酶(-20℃) CHOLINq OXIDcSq 908-67-2
人表皮角质细胞-新生HEK-nN,N'-羰基二咪唑 1,1'-Carbonyldiimidazole (CDI) 530-62-1 10G 通用试剂
RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 钠测试盒(带标准)10个RT
大鼠直肠平滑肌细胞完全培养基 100mL(dNTP混合物)
BMP2 Others Human 人 BMP-2 人细胞裂解液 (阳性对照) DL-4-羟基-3-甲氧基扁桃酸5克
EB病毒转化的人B细胞;KM9333-基 3-Aminobutanoic acid,97% 541-48-0 5G 通用试剂
CD3E Others Human 人 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧化铁;红色氧化铁;205铁红;氧化铁 Iron oxidq rqd;Iron(III) oxidq;Fqrric oxidq 1309-37-1
人脐带间质干细胞 Human umbilical cord mesenchymal stem cells镍丝25克
Saos-2细胞,人成骨肉瘤细胞 鲜绿青霉 人二倍体细胞;HEL1936-15-8橙黄G;1-本基偶氮-2-酚-6,8-二磺酸钠;桔黄G;金橙G;橙黄GG;耐光橙G;酸性耐光桔黄Orange G;Acid
orange 10;Wool orange 2G;Acid orange G;Fast light orange G;C.I. 16230
RatCiatesyhase,CSELISA试剂盒大鼠柠檬酸合酶(CS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 39011-92-2特女贞苷厂家 Specnuezhenide
小鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 ,英文名: LBP ELISA Kit 2752-65-0藤黄酸说明书 Gambogic acid
巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA检测试剂盒MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 96T/48T 62499-27-8天麻素 Gastrodin
犬葡萄糖-6-1酸酶(G6PC)试剂盒 Dog Glucose-6-phosphatase,G6PC ELISA kit 107-43-7甜菜碱规格 Betaine
英文名称HumanAmylinELISAKit人胰淀素(Amylin)规格:96T/48T 57817-89-7甜菊苷厂家 Stevioside
AKT1/AKT2/AKT3 Ab-315/316/312 Antibody注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。