特点：产品仅用于科研
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
参数规格：
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产品名称 |
胎儿弯曲菌CF荧光-PCR法检测试剂盒 |
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规格 |
50T |
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货号 |
FS-P64007 |
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1（10pM）
2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，总线后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。总线好设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用总线高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞 HumanAmmoniumferrilbrown枸橼酸铁250毫克AR，98%
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4- 4-Methoxyacetophenone,99% 100-06-1 10G 通用试剂
人前脂肪细胞-内脏RNAHPA-v NA肖醋胍(*)¤ Gucnidinq nitnctq 206-93-4
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人细胞裂解液 (阳性对照) FastblueBBsalt坚牢蓝BB盐1公斤高，98%
豹猫肺成纤维样细胞;LCL24602-84-0法尼醇FARNESOL
羟乙基纤维素(20000~30000
mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 质量规格：粘度20000~30000 mpa.s 人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)试剂盒 Human iFABP
ELISA Kit
羟乙基纤维素(5500-6500 mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 质量规格：粘度5500-6500 mpa.s 人0酸化微管相关蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)试剂盒 Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit
羟乙基纤维素(40~60 mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 质量规格：粘度40~60 mpa.s 人抗原(Sag)ELISA检测试剂盒Humansupperaigen,SagELISAKit 96T/48T
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG) Isopropyl β-D-thiogalactoside 质量规格：>98%,BR 人敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
甘露糖；D-甘露糖 D-Mannose 质量规格：>99%,BR 人敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)试剂盒 Human Ula Sensitive Prostate Specific Aigen,PSA U S ELISA Kit
D-甘露糖(标准品) D-Mannose 质量规格：HPLC≥98%，标准品 人敏热休克蛋白60(HSP-60)试剂盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit
N-辛酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-8) N-Octanoyl-N-methylglucamine 质量规格：≥97% ,进分 人敏热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit
N-癸酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-10) N-Decanoyl-N-methylglucamine 质量规格：>98%,BR 人巢蛋白1(NID1)试剂盒 Human Nidogen 1,NID1 ELISA Kit
辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷 n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside 质量规格：>98%,BR 人成骨生长肽(OGP)ELISA检测试剂盒HumanOsteogenicGrowthPeptide,OGPELISAKit 96T/48T
D-绵子糖五水；蜜三糖五水 D(+)-Raffinose
pentahydrate 质量规格：>98%,BR 人成纤维细胞生长因子10(FGF10)试剂盒 Human FGF10
ELISA Kit
人层粘连蛋白亚基γ-2(LAMC2)试剂盒 Human LAMC2
ELISA Kit 癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷 Decyl β-D-glucopyranoside 质量规格：>98%,BR
人肠道病毒71型(EV71)抗体(IgM)试剂盒 Human eerovirus 71 virus(EV71)aibody(gM)ELISA kit 德罗特韦(GSK-1349572,DTG) Dolutegravir,GSK1349572 质量规格：>98%,BR
人肠三叶因子(ITF)试剂盒 Human Iestinal efoil factor,ITF ELISA Kit 十二烷基吡喃葡萄糖苷；月桂酰基喃葡萄糖 Dodecyl glucopyranoside 质量规格：>99%,BR
人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)试剂盒 Human iFABP ELISA Kit 羟乙基纤维素(20000~30000 mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 质量规格：粘度20000~30000 mpa.s
人0酸化微管相关蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)试剂盒 Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit 羟乙基纤维素(5500-6500 mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 质量规格：粘度5500-6500 mpa.s
人抗原(Sag)ELISA检测试剂盒Humansupperaigen,Sag 96T/48T 羟乙基纤维素(40~60 mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 质量规格：粘度40~60 mpa.s
人敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG) Isopropyl β-D-thiogalactoside 质量规格：>98%,BR
人敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)试剂盒 Human Ula Sensitive Prostate Specific Aigen,PSA U S ELISA Kit 甘露糖；D-甘露糖 D-Mannose 质量规格：>99%,BR
人敏热休克蛋白60(HSP-60)试剂盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit D-甘露糖(标准品) D-Mannose 质量规格：HPLC≥98%，标准品
人敏热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒 Human Ula Sensitive Heat
Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit N-辛酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-8) N-Octanoyl-N-methylglucamine 质量规格：≥97% ,进分
胎儿弯曲菌CF荧光-PCR法检测试剂盒定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，*终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
