线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性-上海西格生物科技有限公司

生化法检测试剂盒：分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法，研发，*技术研发团队，操作简便快捷，规格合理、系列成套，价格合理，是广大科研工作者的好选择，详细产品咨询：
产品名称：线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性
检测方法：微量法
规格：0.2g或者0.2mL

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
需自备的仪器和用品：
液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器（水系，50个，0.22μm）、滤膜（水系1个，0.45μm）、钙柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2mL）、纯水。
线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性

通用规则：

1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
实验结果判断我有妙招：
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：
① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。

操作步骤(仅供参考)：
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后，可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
白介素受体相关激酶elisa方法 IRAK 试剂盒
白介素5受体alpha检测试剂盒 IL5RA 试剂盒
白介素-5酶联免疫试剂盒 IL-5 试剂盒
白介素37ELISA试剂盒 IL-37 试剂盒
白介素2诱导的T细胞激酶进口试剂盒 ITK 试剂盒
白介素2受体试剂盒 IL2R 试剂盒
白介素2可溶性受体β链定量试剂盒 IL-2sRβ 试剂盒
白介素2可溶性受体α链测定试剂盒 IL-2sRα 试剂盒
白介素24试剂盒elisa IL-24 试剂盒
白介素23Aelisa方法 IL-23A 试剂盒
白介素1受体样1检测试剂盒 IL1RL1 试剂盒
白介素1受体相关激酶-4酶联免疫试剂盒 IRAK-4 试剂盒
白介素1受体相关激酶1ELISA试剂盒 IRAK1 试剂盒
白介素1可溶性受体Ⅱ进口试剂盒 IL-1sRⅡ 试剂盒
白介素1可溶性受体Ⅰ试剂盒 IL-1sRⅠ 试剂盒
白介素1β转换酶定量试剂盒 ICE 试剂盒
白介素1β前体测定试剂盒 pro-IL1B 试剂盒
白介素1Rα试剂盒elisa IL-1Rα 试剂盒
白介素17Belisa方法 IL17B 试剂盒
白介素17A检测试剂盒 IL-17A试剂盒
白介素12受体亚基β-1酶联免疫试剂盒 IL12RB1 试剂盒
白介素12受体ELISA试剂盒 IL-12R 试剂盒
白介素1进口试剂盒 IL-1 试剂盒
白喉抗体试剂盒 Diphtheria antibody 试剂盒
白蛋白定量试剂盒 ALB 试剂盒
靶向核糖核酸酶测定试剂盒 TR 试剂盒
八聚体转录因子试剂盒elisa OTF2A 试剂盒
艾柯病毒IgMelisa方法 ECHO IgM 试剂盒
艾柯病毒IgG检测试剂盒 ECHO IgG 试剂盒
艾杜糖硫酸酯酶酶联免疫试剂盒 IDS 试剂盒
癌症促凝素ELISA试剂盒 CP 试剂盒
癌胚铁蛋白进口试剂盒 CEF 试剂盒
癌抗原27-29试剂盒 CA 27-29 试剂盒
bcr-ablELISA定量试剂盒 Oncogene Protein p190试剂盒
癌蛋白诱导转录物3测定试剂盒 OIT3 试剂盒
阿米巴试剂盒elisa Amebiasis 试剂盒
阿立新Aelisa方法 Orexin A 试剂盒
阿拉伯半乳糖蛋白检测试剂盒 AGPs 试剂盒
阿黑皮素原酶联免疫试剂盒 POMC 试剂盒
吖啶橙ELISA试剂盒 AO 试剂盒
ω干扰素进口试剂盒 IFN-ω 试剂盒
κB抑制蛋白激酶试剂盒 IKK 试剂盒
γ肽定量试剂盒 Pγ 试剂盒
γ谷氨酰转移酶测定试剂盒 GGT 试剂盒
γ谷氨酰半胱氨酸合成酶试剂盒elisa γ-ECS 试剂盒
γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶elisa方法 γ-GCS 试剂盒
p16检测试剂盒 IFI16试剂盒
γ干扰素受体酶联免疫试剂盒 IFN-γR 试剂盒
γ干扰素ELISA试剂盒 IFNγ 试剂盒
γ分泌素激活蛋白进口试剂盒 PION 试剂盒
γ分泌酶ELISA试剂盒 γ-Secretase 试剂盒
线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性γ氨基丁酸定量试剂盒 GABA 试剂盒
β-转导素重复序列包含蛋白测定试剂盒 BTRC 试剂盒
β抑制蛋白2试剂盒elisa ARRB2 试剂盒

线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性

发布时间：2021-08-06