丙酮酸激酶 PK-上海西格生物科技有限公司

生化法检测试剂盒：分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法，研发，*技术研发团队，操作简便快捷，规格合理、系列成套，价格合理，是广大科研工作者的好选择，详细产品咨询：
产品名称：丙酮酸激酶 PK
检测方法：微量法
规格：0.2g或者0.2mL

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
需自备的仪器和用品：
液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器（水系，50个，0.22μm）、滤膜（水系1个，0.45μm）、钙柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2mL）、纯水。
丙酮酸激酶 PK

通用规则：

1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
实验结果判断我有妙招：
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：
① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。

操作步骤(仅供参考)：
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后，可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
抗转谷氨酰胺酶抗体检测试剂盒 Transglutaminase 6 antibody IgA 试剂盒
抗中性粒细胞抗体酶联免疫试剂盒 ANA 试剂盒
抗中性粒细胞核周抗体ELISA试剂盒 pANCA 试剂盒
丙酮酸激酶 PK抗中性粒细胞胞浆抗体进口试剂盒 cANCA IgM 试剂盒
中心体抗体试剂盒 ACA 试剂盒
抗着丝点抗体定量试剂盒 ACA试剂盒
抗增殖细胞核抗原抗体测定试剂盒 PCNA 试剂盒
抗载脂蛋白抗体A1试剂盒elisa Apo A1 试剂盒
T细胞活化蛋白elisa方法 TAP 试剂盒
抗硬皮病抗体70检测试剂盒 SCL70试剂盒
抗抑制素B抗体酶联免疫试剂盒 anti-Inhibin B antibody IgG 试剂盒
抗RA33抗体ELISA试剂盒 anti-hnRNP-ab试剂盒
抗乙型肝炎病毒核心抗体进口试剂盒 HBcAb 试剂盒
抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体试剂盒 HBc-IgM antibody 试剂盒
抗乙型肝炎病毒表面抗体定量试剂盒 HBsAb 试剂盒
抗乙型肝炎病毒e抗体测定试剂盒 HBeAb 试剂盒
抗胰岛素受体抗体试剂盒elisa AIRA 试剂盒
抗胰蛋白酶elisa方法 AT 试剂盒
抗眼肌抗体检测试剂盒 EMAb 试剂盒
抗血小板抗体IgM酶联免疫试剂盒 PA-IgM 试剂盒
AELISA试剂盒 PA-IgG试剂盒
抗血小板抗体IgG进口试剂盒 platelet antibodies IgG试剂盒
抗血小板抗体IgA试剂盒 PA-IgA 试剂盒
抗血小板抗体定量试剂盒 anti-PA Ab 试剂盒
抗胸腺细胞球蛋白测定试剂盒 ATG 试剂盒
抗信号识别颗粒抗体试剂盒elisa SRP 试剂盒
抗信号识别颗粒54kDa蛋白elisa方法 anti signal recognition particle 54 kDa protein试剂盒
抗心磷脂抗体IgM检测试剂盒 ACA-IgM 试剂盒
抗心磷脂抗体IgG酶联免疫试剂盒 ACA-IgG 试剂盒
抗心磷脂抗体IgAELISA试剂盒 ACA-IgA 试剂盒
抗心肌抗体进口试剂盒 AMA 试剂盒
抗心肌β1受体试剂盒 myocardial β1 receptor 试剂盒
抗小鼠抗体定量试剂盒 HAMA 试剂盒
抗小脑测定试剂盒 anti cerebellum 试剂盒
Sm试剂盒elisa small nuclear ribonucleoprotein试剂盒
抗线粒体抗体M2亚型elisa方法 AMA-M2 试剂盒
抗线粒体抗体检测试剂盒 AMA 试剂盒
抗细胞膜DNA抗体酶联免疫试剂盒 cmDNA 试剂盒
抗纹状体ELISA试剂盒 anti striatum试剂盒
抗胃壁细胞抗体进口试剂盒 AGPA试剂盒
抗尾状核试剂盒 anti caudate nucleus试剂盒
抗网硬蛋白抗体定量试剂盒 ARA 试剂盒
抗外切酶体复合物成分RRP45测定试剂盒 anti exosome complex component RRP45试剂盒
抗外切酶体成分10试剂盒elisa anti exosome component 10试剂盒
抗唾液腺导管组织抗体elisa方法 SDA 试剂盒

丙酮酸激酶 PK

发布时间：2021-08-06