操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
血栓素B2进口试剂盒 TX-B2 试剂盒
血栓素A2合成酶试剂盒 Thromboxane-A2 Synthase试剂盒
血栓前体蛋白定量试剂盒 TpP 试剂盒
血清补体测定试剂盒 CH50 试剂盒
血清胺试剂盒elisa ST 试剂盒
血清淀粉样蛋白Pelisa方法 SAP 试剂盒
血清淀粉样蛋白A4检测试剂盒 SAA4 试剂盒
血清淀粉样蛋白A3酶联免疫试剂盒 SAA3 试剂盒
血清淀粉样蛋白AELISA试剂盒 SAA 试剂盒
血清剥夺反应相关蛋白进口试剂盒 SDPR 试剂盒
血清白蛋白试剂盒 HSA 试剂盒
糖皮质激素调节激酶2定量试剂盒 GSK2 ISA KIT试剂盒
血凝素测定试剂盒 HA 试剂盒
血浆纤维连接蛋白试剂盒elisa pFN 试剂盒
血浆抗凝蛋白Selisa方法 PS 试剂盒
血浆抗凝蛋白C检测试剂盒 PC 试剂盒
血浆激肽释放酶酶联免疫试剂盒 KLKB1 试剂盒
血浆胆固醇酯转移蛋白ELISA试剂盒 CETP 试剂盒
血浆α颗粒膜蛋白进口试剂盒 GMP-140 试剂盒
血红素加氧酶2试剂盒 HO-2 试剂盒
血红素加氧酶1定量试剂盒 HO-1 试剂盒
血清高密度脂蛋白 HDL-C血红素加氧酶测定试剂盒 HO 试剂盒
血红蛋白晚期糖基化终末产物试剂盒elisa Hb-AGE 试剂盒
血红蛋白β亚基elisa方法 HB-β 试剂盒
血红蛋白α亚基检测试剂盒 HB-α 试剂盒
血红蛋白H酶联免疫试剂盒 HbH 试剂盒
血红蛋白CELISA试剂盒 HbC 试剂盒
血红蛋白进口试剂盒 Hb 试剂盒
血管稳定蛋白试剂盒 ANG 试剂盒
血管性血友病因子裂解酶定量试剂盒 ADAMTS-13试剂盒
瑞斯托霉素辅因子测定试剂盒 vWF 试剂盒
血管性血友病因子试剂盒elisa VWF 试剂盒
血管舒缓激肽elisa方法 BK 试剂盒
血管生长素检测试剂盒 ANG 试剂盒
血管生成抑制因子酶联免疫试剂盒 Arresten 试剂盒
血管生成素样蛋白4ELISA试剂盒 ANGPTL4 试剂盒
血管生成素样蛋白3进口试剂盒 ANGPTL3 试剂盒
含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2试剂盒 Tie-2 试剂盒
含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1定量试剂盒 Tie1 试剂盒
血管内皮抑素抗体测定试剂盒 ES-Ab 试剂盒
血管内皮细胞粘附分子1试剂盒elisa VCAM-1 试剂盒