生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,研发,*技术研发团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择,详细产品咨询:
产品名称:蛋白定量测试盒带标准;双缩脲法
检测方法:盒
规格:100管/96样 50管/48样
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
需自备的仪器和用品:
液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系1个,0.45μm)、钙柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、纯水。
通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
产品名称:蛋白定量测试盒带标准;双缩脲法
检测方法:盒
规格:100管/96样 50管/48样
但马胶;但马树脂;达麻脂 9000-16-2 GuM daMMar;DaMMar;DaMar
茄替胶;印度树胶;锡兰树胶 9000-28-6 GuM ghatti;Indian guM;GuMMi indicuM
愈创木胶;愈创木脂 9000-29-7 GuM guaiaci;GuM guaiac;Resin guaiac;Guaiac;
乳香胶;乳香;玛帝树胶;玛帝脂 61789-92-2 GuM Mastic;Mastiche;Mastix;Mastic;Lentisk;BalsaM tree;Mastisol
山达胶;山达脂;非洲松香 GuM sandarac;Juniper guM;
黄蓍树胶粉;西黄蓍胶粉;托辣甘树胶 9000-65-1 GuM tragacanth powder
苏木色精;苏木精 517-28-2 HeMatoxylin;(Z)-11-HDOL;Hydroxybrasilin;Natural black-1;C.I.75290
二十七烷;正二十七烷 593-49-7 Heptacosane;n-Heptacosane
十七烷 629-78-7 Heptadecane
七氟丁酸 375-22-4 HEPTAFLUOROBUTYRIC ACID
六氯苯;过氯苯;六氯代苯;全氯代苯 118-74-1 Hexachlorobenzene;Anticarie;Bunt-cure;Bunt-no-More;
六氯乙烷;全氯乙烷;六氯化碳;过氯乙烷;六氯化二碳 67-72-1 Hexachloroethane;Carbon hexachloride
(1-十六烷基)溴化吡啶,一水化合物 140-72-7 1-Hexadecylpyridinium bromide
十六烷基三甲基溴化铵;鲸蜡烷三甲基溴化铵 57-09-0 HexadecyltriMethylaMMoniuM broMide;CetriMoniuM broMide;CetriMide;Cetavlon;CTAB
六甲苯 87-85-4 HexaMethylbenzene;Mellithene
蛋白定量测试盒带标准;双缩脲法六甲基二硅醚;六甲基氧二硅烷;六甲基二硅氧烷 107-46-0 HexaMethyldisiloxane;HMDSO
己二腈;己烷二腈;1,4-二氰基丁烷 111-69-3 Hexanedinitrile;1,4-Dicyanobutane;TetraMethylene dicyanide;Adipic dinitrile
三十六烷;正三十六烷 630-06-8 Hexatriacontane
马尿酸;苯甲酰氨基乙酸;苯甲酰甘氨酸 495-69-2 Hippuric acid;Benzoyl-aMino acetic acid;N-Benzoylglycine;Benzoylglycocoll
组胺磷酸盐;二磷酸组织胺 51-74-1 HistaMine phosphate;Histapon
高香草酸;4-羟基-3-甲氧基-α-甲苯甲酸;4-羟基-3-甲氧基苯乙酸 306-08-1 HoMovanillic acid;4-Hydroxy-3-Methoxy-α-toluic acid;4-Hydroxy-3-Methoxyphenylacetic acid;HoMoprotocatechuic acid 3-Methyl ether;HVA
透明质酸钠盐;透明质酸钠;动物糖醛酸钠;玻璃(糖醛)酸钠 9067-32-7 Hyaluronic acid sodiuM salt;Connettivina;Equron;Healon;Healonid;Hya-lgan;Hyalovet;Opegan;Synacid
透明质酸,从鸡冠花所得 9004-61-9 Hyaluronic acid
操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。