蛋白定量测试盒带标准BCA法-上海西格生物科技有限公司

生化法检测试剂盒：分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法，研发，*技术研发团队，操作简便快捷，规格合理、系列成套，价格合理，是广大科研工作者的好选择，详细产品咨询：
产品名称：蛋白定量测试盒带标准；BCA法
检测方法：盒
规格：96T 48T

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
需自备的仪器和用品：
液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器（水系，50个，0.22μm）、滤膜（水系1个，0.45μm）、钙柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2mL）、纯水。
β-淀粉酶

通用规则：

1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
实验结果判断我有妙招：
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：
① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。

产品名称：蛋白定量测试盒带标准；BCA法
检测方法：盒
规格：96T 48T
aMino-8-hydroxy-2,4-disulfo)naphthylazo]3,3′-bitolyl tetrasodiuM salt;Direct blue 53;C.I. 23860
EXOSAP-IT 2000 RXNS
固黑B盐;黑色基B;4,4′二氨基二苯胺硫酸盐 Fast black B salt;4,4′-DiaMinodiphenylaMinesulfate salt;C.1. 37245;
固黑G盐 Fast black G salt;C.I. 37260;
固蓝BB盐;氯化-4-重氮-2,5-二乙氧基-N-苯甲酰基苯胺氯化锌盐 5486-84-0 Fast blue BB salt;4-Benzoyl-aMino-2,5-diethoxybenzene diazoniuM chloride heMi[Zinc chloride]salt;Diazo fast blue BB;Fast blue BBN salt;Azoene fast blue BBN salt;4-AMino-2,5-diethoxybenzanilide diazotate zinc do
固暗蓝R盐;坚牢深蓝R盐;4-氨基-2,5-二甲氧基-4′-硝基偶氮二氯苯重氮盐 Fast dark blue R salt;Azoic diazo No.51;Diazo fast dark blue R;4-AMino-2,5-diMethoxy-4′-nitroazodichlorobenzene diazoniuM salt;C.I.37195;
固绿 FCF 2353-45-9 brilliant blue G
固红GG盐;坚牢红盐;对硝基苯重氮氟硼酸盐 456-27-9 Fast red GG salt;Fast red 2G salt;p-NitrophenyldiazoniuM fluoborate;p-NitrobenzenediazoniuM tetrafluoroborate;p-Nitroaniline diazoniuM salt;Azoic diazo No.37;C.I. 37035
固红RC盐 85252-22-8 Fast red RC salt;DiazoniuM salt of 4-chloro-2-aMinoanisole;Diazotized 4-chloro-o-anisidine;2-AMino-4-chloroanisole diazotated zinc double salt;Diazo red RC;Azoic diazo 0;C.I. 37120
二茂铁;环戊二烯铁 102-54-5 Ferrocene;Biscyclopentadienyl iron;Di-2,4-cyclopentadien-1-yl iron
阿魏酸;4-羟基3-甲氧基肉桂酸;咖啡酸-3-甲醚 537-98-4 Ferulic acid;3-Methoxy-4-hydroxy cinnaMic acid;Caffeic acid 3-Methyl ether;3-(4-Hydroxy-3-Methoxyphenyl)-2-propenoic acid
荧光素;荧光橙 2321/7/5 Fluorescein;Dihydroxyfluorane;Tetraoxyphthalophenonean hydride;C.I. 45350
氟硅酸;氢氟硅酸;氢硅氟酸;硅氟酸;六氟硅酸 16961-83-4 Hydrofluosilicic acid;Hydrosilicofluoric acid;Fluosilicic acid;Silicofluoric acid;Hexafluorosilicic acid;Fluorosilicic acid;Sand acid;
叶酸;维生素Bc;维生素M 75708-92-8 Folic Acid;VitaMin M or VitaMin Bc;VitaMin M;Pte Glu
甲醛;*;福美林;甲醛水;蚁醛溶液 50-00-0 ForMalin
甲酰胺;氨基甲醛 1975/12/7 ForMaMide;ForMic acid aMide;ForMylaMide;AMide C1
氯仿(易制毒-2);哥罗仿;氯仿 67-66-3 ForMyl trichloride;Methenyl trichoride;TrichloroMethare
FTA纯化 FTA Purification Reagent
酸性品红;复红 3244-88-0 Fuchsin acid;Rubin S;Acid Magenta;Acid roseine;Acid fuchsin;Acid rubin;SodiuM salt of rosaniline trisulfonic acid;Acid violet 19;C.I.42685

操作步骤(仅供参考)：
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后，可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用蛋白定量测试盒带标准；BCA法预冷的生理盐水洗涤3次。
,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

蛋白定量测试盒带标准BCA法

发布时间：2021-08-11