实验内容:
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
产品名称:云芝 斜面
拉丁文: Coriolus
Versicolor (L.:Fr.) Quel
提供形式: 斜面
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 药用。
培养基: 综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏水中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。
生长条件: 25℃,严格好氧
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产品名称 |
云芝 斜面 |
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英文名称 |
Coriolus Versicolor (L.:Fr.) Quel |
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货号 |
FS-J64349 |
公司代理ATCC菌种, 质量保证,为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
菌种培养:产品仅用于科研
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) 利格列汀;利拉利汀质量规格:>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制剂Linagliptin
CL-0329Chang liver (CCL13) (张氏肝细胞)5×106cells/瓶×2L-谷氨酸-α-苄酯质量规格:>98%,BRL-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester
CNDP1 Others Mouse 小鼠 CNDP1 细胞裂解液 (阳性对照) L-亮氨酸乙酯盐酸盐质量规格:>98%H-Leu-OEt·HCl
小鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mLL-苯丙氨酸质量规格:>99%,BRL-Phenylalanine
Psi2 DAP小鼠胚胎成纤维细胞 Psi2 DAP mouse embryo fibroblasts DMEM培养基+10%FBSL-天冬酰胺;L-天冬酰一水 质量规格:>99%,BR,一水L-Asparagine Monohydrate
亚西酸盐胱氨酸增菌液(SC) 100g 用于沙门氏菌选择性增菌培养。(GB18466-2005) 氧化物歧化酶分析试剂盒SOD
脉络丝成纤维细胞 (HCPF)( 5×105 )盐酸多柔比星/盐酸阿霉素质量规格:>98%,BRDoxorubicin HCl/Adriamycin
肠平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)盐酸多柔比星/盐酸阿霉素(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Doxorubicin HCl/Adriamycin
色素瘤细胞;A875 大鼠肠上皮细胞完全培养基 100mL盐酸丁卡因(标准品)质量规格:HPLC法含量测定Tetracaine HCl
DH82 狗肾恶性组织细胞增生症细胞苯甲唑啉盐酸盐/盐酸妥拉唑林质量规格:>98%,进口原装Tolazoline HCl
CD19
Others Human CD19 / Leu-12 细胞裂解液 (阳性对照) 1酸托特罗定质量规格:>98.5%,M受体(毒蕈碱型乙酰胆碱受体)拮抗剂Tolterodine Tartrate
三七根腐病菌Cylindrocarponsp.
拉曼被孢霉
苦杏仁甙发酵管5ml 30 支/盒 玫瑰红琼脂培养基90mm
皱木耳 脱氮假单胞菌
大肠杆菌 橙色粘球菌
琥珀毛壳 匍匐放射毛霉或雅致放射毛霉
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于*适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 云芝 斜面低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*广的微生物保存法。