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英文简称:M-1细胞
产品名称:小鼠肾集合管细胞
规格:肾集合管;SV40转化
形态特性:DMEM
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
ELA2 ELISA Kit; 人弹性蛋白酶2,中性粒细胞ELISA试剂盒
Elastase ELISA Kit; 人弹性蛋白酶ELISA试剂盒
ELN ELISA Kit; 人弹性蛋白ELISA试剂盒
Cholic acid ELISA Kit; 人胆酸ELISA试剂盒
CCK-8 ELISA Kit; 人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽ELISA试剂盒
CCK ELISA Kit; 人胆囊收缩素/肠促胰酶肽ELISA试剂盒
SLC44A4 ELISA Kit; 人胆碱转运体样蛋白4ELISA试剂盒
ChAT ELISA Kit; 人胆碱乙酰转移酶ELISA试剂盒
CETP ELISA Kit; 人胆固醇酯转移蛋白ELISA试剂盒
CYP7A ELISA Kit; 人胆固醇7α-羟化酶ELISA试剂盒
CH ELISA Kit; 人胆固醇ELISA试剂盒
LIMK1 ELISA Kit; 人单丝氨酸蛋白激酶1ELISA试剂盒
MCP-4/CCL13 ELISA Kit; 人单核细胞趋化蛋白4ELISA试剂盒
MCP-3/CCL7 ELISA Kit; 人单核细胞趋化蛋白3ELISA试剂盒
MCP-2/CCL8 ELISA Kit; 人单核细胞趋化蛋白2ELISA试剂盒
MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit; 人单核细胞趋化蛋白1ELISA试剂盒
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HSVⅡ-Ab ELISA Kit; 人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体IgMELISA试剂盒
HSVⅡ-Ab ELISA Kit; 人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体IgGELISA试剂盒
IgM ELISA Kit; 人单纯疱疹病毒Ⅰ型ELISA试剂盒
IgG ELISA Kit; 人单纯疱疹病毒Ⅰ型ELISA试剂盒
IgM ELISA Kit; 人单纯疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型ELISA试剂盒
IgG ELISA Kit; 人单纯疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型ELISA试剂盒
MAO ELISA Kit; 人单胺氧化酶ELISA试剂盒
Band3 ELISA Kit; 人带3蛋白ELISA试剂盒
BP ELISA Kit; 人大疱性类天疱疮抗体ELISA试剂盒
Big ET-1 ELISA Kit; 人大内皮素ELISA试剂盒
CCSA-4 ELISA Kit; 人大肠癌专一抗原4ELISA试剂盒
CCSA-3 ELISA Kit; 人大肠癌专一抗原3ELISA试剂盒
CCSA-2 ELISA Kit; 人大肠癌专一抗原2ELISA试剂盒
Surv ELISA Kit; 人存活素抗体/生存蛋白ELISA试剂盒
FHIT ELISA Kit; 人脆性组氨酸三联体ELISA试剂盒
PIP ELISA Kit; 人催乳素诱导蛋白ELISA试剂盒
PIH ELISA Kit; 人催乳素抑制激素ELISA试剂盒
PRH ELISA Kit; 人催乳素释放激素ELISA试剂盒
PRL ELISA Kit; 人催乳素ELISA试剂盒
OXTR ELISA Kit; 人催产素受体ELISA试剂盒
OT ELISA Kit; 人催产素ELISA试剂盒
Secretin ELISA Kit; 人促胰液素/胰泌素ELISA试剂盒
SR ELISA Kit; 人促胰液素/分泌素受体ELISA试剂盒
GnRH ELISA Kit; 人促性腺激素释放激素ELISA试剂盒
ASP ELISA Kit; 人促酰化蛋白ELISA试剂盒
GsaR ELISA Kit; 人促胃液素受体ELISA试剂盒
DSIP ELISA Kit; 人促睡眠肽ELISA试剂盒
GHRH ELISA Kit; 人促生长激素释放激素ELISA试剂盒
ACTH ELISA Kit; 人促肾上腺皮质激素ELISA试剂盒
CRH ELISA Kit; 人促肾上皮质激素释放激素ELISA试剂盒
FSH ELISA Kit; 人促卵泡素ELISA试剂盒
TSHR ELISA Kit; 人促甲状腺素受体ELISA试剂盒