SKM-1细胞

发布时间:2021-08-31

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英文简称:SKM-1细胞
产品名称:骨髓增生异常综合征细胞
规格:T25
形态特性:
生长特性:贴壁生长
特征特性:
培养条件:RPMI1640+10% or 20%FBS

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
IRS-4 胰岛素受体底物-4抗体
IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗体
IASPP 肿瘤细胞凋亡ASPP家族的另一个成员抗体
ICAD Caspase激活的脱氧核糖核酸酶抑制剂抗体
Insulin Receptor alpha 胰岛素受体α抗体
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合素α3β1抗体
Integrin beta 7 整合素β7抗体
IQGAP1 支架蛋白抗体
IGC 非洲爪蟾IGC抗体
IFITM1 干扰素诱导跨膜蛋白1抗体
IFN-β 干扰素β抗体
IFN gamma(F2E4) γ-干扰素/γ-IFN单克隆抗体
IFN gamma 干扰素-γ/IFN-γ抗体
IFN gamma 干扰素-γ/IFN-γ抗体
IGF1R 胰岛素样生长因子I受体抗体
IGF1R 胰岛素样生长因子1受体抗体
IGFBP2 胰岛素样生长因子结合蛋白2抗体
IGFBP5 胰岛素样生长因子结合蛋白5抗体
IGF 1 胰岛素样生长因子1抗体
IGF II 胰岛素样生长因子-II抗体
IL-10 白细胞介素10抗体
IL-13 白介素13抗体
IL-17 白介素-17抗体
IL-18 白细胞介素-18/干扰素γ诱导因子抗体
IL1RAPL1 白介素1受体相关蛋白样1前体蛋白抗体
IL-1 Beta 白介素1β/IL-1β抗体
IL-2 白介素2抗体(大、小鼠)
IL-2(H2E4) 白细胞介素-2单克隆抗体
IL-23 白介素-23抗体
IL-4 白介素4抗体
IL-6 白介素6
IL-6 白介素6抗体
IL-6 白介素6抗体
Inhibin Alpha 抑制素A/Inhibin α抗体
SKM-1细胞ILTV glycoprotein E 鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白E抗体
intestinal FABP 小肠型脂肪酸结合蛋白抗体
IL-7Ra 白细胞介素-7受体a抗体
Integrin alpha 3 整合素α3抗体
Integrin beta 5 整合素β5抗体
Integrin alpha 1 整合素α1抗体

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