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英文简称:NCI-H2405细胞
产品名称:非小细胞肺癌细胞
规格:T25
形态特性:
生长特性:混合生长
特征特性:
"培养条件:ACL-4 medium serum-free
The
0.02 mg/ml insulin
0.01 mg/ml transferrin
25 nM sodium selenite final conc.
50 nM Hydrocortisone final conc.
1 ng/ml Epidermal Growth Factor do not filter
0.01 mM ethanolamine final conc.
0.01 mM phosphorylethanolamine final conc.
100 pM triiodothyronine final conc.
0.5% w/v bovine serum albumin final conc.
0.5 mM sodium pyruvate final conc.
extra 2mM L-glutamine for final conc. of 4.5mM"
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养方法:1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
CSNK1G1 酪蛋白激酶1γ1抗体
C21orf88 21号染色体开放阅读框88抗体
C21orf54 21号染色体开放阅读框54抗体
CHK2 细胞周期检测点激酶2抗体
Cyclin T1 周期素依赖性激酶9抗体
Cdc6 细胞分裂周期蛋白6抗体
CDC34 细胞周期调控因子34
CEBP Beta 转录调节因子C/EBP β抗体
CBP CREB结合蛋白抗体
CCL11 嗜酸粒细胞趋化蛋白抗体
CD146 黑色素瘤细胞粘附分子CD146抗体
phospho-Cyclin E (Thr77) 磷酸化周期素E抗体
Alpha s2 Casein α-s2酪蛋白抗体
Cathepsin B 组织蛋白酶B抗体
CXCL10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗体
CXCL14 CXC趋化因子14抗体
Casein 酪蛋白抗体
C4 binding protein 补体4结合蛋白
CD158e NK细胞抑制性受体3DL1抗体
C9orf116 9号染色体开放阅读框116抗体
phospho-c-Jun(Ser63) 磷酸化原癌基因c-Jun抗体
phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗体
C1orf229 1号染色体开放阅读框229抗体
Cecropin 杀菌肽/天蚕抗菌肽抗体
Cullin 4A Cullin 4a蛋白抗体
CK3 细胞角蛋白3抗体
C5orf52 5号染色体开放阅读框52抗体
CCDC85B 卷曲螺旋结构域蛋白85B抗体
Claudin 14 紧密连接蛋白14抗体
NCI-H2405细胞CMV(1F11) 人巨细胞病毒单克隆抗体
CEA 癌胚抗原抗体
CXCR3 细胞表面趋化因子受体3抗体
C1orf33 1号染色体开放阅读框33抗体