本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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粪肠球菌PCR试剂盒 |
50次 |
负20度 |
BH-P63603 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
磷酸甘油酸脱氢酶检测试剂盒N-叔丁氧羰基-N(咪唑)-(4-磺酰基)-L-组氨酸 98%1,2:3,5-双-O-异亚基-alpha-D-呋喃木糖 98%Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC 荧光素标记磷酸化信号转导分子Smad-1/5抗体IgG
轻链铁蛋白检测试剂盒N-Boc-N'-三苯甲基-L-组氨酸 98%双酮-D-甘露糖 97%Anti-Smad2/3 /FITC 荧光素标记Smad 2/3抗体IgG
糖基化CD59检测试剂盒N-叔丁氧羰基-N'-苄氧羰基-L-组氨酸 BR(R)-2，5-二氢-3，6-二甲氧基-2-异基吡 97%Anti-phospho-Smad2(p-Ser465) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、牛，马，犬，鸡磷酸化Smad2抗体IgG
铁蛋白重链检测试剂盒12(S)-2，5-二氢-3，6-二甲氧基-2-异基吡 97%Anti-Phospho-Smad2 (Ser465/467)/FITC 荧光素标记磷酸化信号转导分子SMAD2抗体IgG
色素P4502B6检测试剂盒N,N'-二叔丁氧羰基-L-赖氨酸 N-丁二酰亚酯 97%2'-脱氧胸苷-5'-三磷酸三钠,二水 96%Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 荧光素标记磷酸化信号转导分子SMAD2抗体IgG
生四烯酸-15-脂加氧酶检测试剂盒N-叔丁氧羰基-N'-(乙酰基)-L-赖氨酸 BRN-癸酰基-N-甲基葡糖 高纯级Anti-Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 荧光素标记磷酸化信号转导分子SMAD3抗体IgG
15-羟基PGD2脱氢酶检测试剂盒N-叔丁氧羰基-N'-(2-氯苄氧羰基)-L-赖氨酸 98%D-(+)-塔罗糖 99%Anti-Smad4/FITC 荧光素标记Smad4抗体IgG
脂氧合酶同工酶5检测试剂盒Nα-BOC-Nε-FMOC-L-赖氨酸 BRD-塔格糖 99%Anti-Smad7/FITC 荧光素标记Smad 7抗体IgG
抗凝血素IgM抗体检测试剂盒N-Boc-N'-Fmoc-D-赖氨酸 97%D-山梨糖 98%Anti-SMC1/FITC 荧光素标记染色体结构维持蛋白质１抗体IgG
信号素7A检测试剂盒Boc-Lys(Z)-pNA 98.5% D-半乳糖酸 97%Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 荧光素标记磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体IgG
凋亡蛋白酶激活因子1检测试剂盒丁氧羰基-甲硫氨酸(O)-OH BR1-甘露糖野尻霉素盐酸盐 98%Anti-Phospho-SMC1 (Ser957)/FITC 荧光素标记磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体IgG
T淋巴转录调节因子检测试剂盒N-叔丁氧羰基-N'-芴甲氧羰基-L-鸟氨酸 99%2-脱氧-L-核糖 99%Anti-SMN1/FITC 荧光素标记运动神经元生存蛋白1抗体IgG
凋亡有关蛋白激酶2检测试剂盒N-叔丁氧羰基-N'-苄氧羰基-L-鸟氨酸 98%1-乙基-(3-二甲基氨基基)碳二亚盐酸盐 98.5% Anti-Snail/FITC 荧光素标记抗Snail蛋白抗体IgG
线粒体羟甲基戊二酸单酰辅酶A合酶2检测试剂盒N-叔丁氧羰基-N'-(2-氯苄氧羰基)-L-鸟氨酸 98% D(+)岩藻糖 99%Anti-Snake poison Protein/FITC 荧光素标记抗蛇蛋白抗体（蝮蛇）IgG
核糖核酸酶A3检测试剂盒BOC-L-丝氨酸甲酯 BRL-岩藻糖 99%Anti-Snake poison Protein/FITC 荧光素标记抗蛇蛋白抗体（眼镜蛇）IgG
粪肠球菌PCR试剂盒小鼠谷胱甘肽还原酶(GR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CC16(Clara Cell 16kD protein) ELISA Kit3号染色体开放阅读框33抗体
小鼠谷胱甘肽S-转移酶α1(GSTa1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CDNF(Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor) ELISA Kit3号染色体开放阅读框39抗体
小鼠谷胱甘肽S-转移酶Ω1(GSTo1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CDX2(Homeobox protein CDX-2) ELISA Kit3号染色体开放阅读框59抗体
小鼠谷胱甘肽S-转移酶θ1(GSTt1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CCK-8(Cholecystokinin 8) ELISA Kit5号染色体开放阅读框51抗体
小鼠谷胱甘肽S-转移酶θ2(GSTt2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CBX3(Chromobox Homolog 3) ELISA Kit3号染色体开放阅读框70抗体
小鼠糖化血红蛋白(HbA1c)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CENPA(Centromere Protein A) ELISA Kit2号染色体开放阅读框68抗体
小鼠大脑糖原磷酸化酶(PYGB)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CC16(Clara Cell 16kD protein) ELISA Kit2号染色体开放阅读框47抗体
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
