本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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货号
乙型流感病毒Yamagata检测试剂盒、荧光PCR法
50T
详见说明书
BH-P63725
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
Pim-2原癌基因检测试剂盒羟乙基纤维素 250~450mpa.s,25℃3-溴代苯乙酮 98%PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周围神经髓鞘蛋白2抗原
pro-MMP-9检测试剂盒羟乙基纤维素 1000~1500mpa.s,25℃2,4-二甲 97%MYSM1(Myb-like, SWIRM and MPN domain-containing protein 1) MYSM1抗原
PTEN;MMAC1检测试剂盒羟乙基纤维素 1500~2500mpa.s,25℃对氨基苯乙 98%MYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原
P物质检测试剂盒羟乙基纤维素 2600~3300mpa.s,25℃亚氨基二乙 95%CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 烟碱型乙酰胆碱受体α7(多肽)
P选择素检测试剂盒羟乙基纤维素 5000~6400mpa.s,25℃亚铁化钠 ARNanog fragment 干关键蛋白(多肽)
Qa淋巴抗原2检测试剂盒羟基纤维素 2%粘度6mPa.s;甲氧基28-30%;羟基7.0-12%亚铁化钠 CPNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 纳曲酮偶联牛血清白蛋白:纳曲酮偶联血蓝蛋白
RAS癌基因家族成员RAB5a检测试剂盒羟基纤维素 2%粘度15mPa.s;甲氧基28-30%;羟基7.0-12%羧甲基纤维素钠 粘度: 300-800mpa.s,USP级NAP1 (nucleosome assembly protein 1) 核小体组装蛋白1(多肽)
R-脊椎蛋白2检测试剂盒羟基纤维素 I型,粘度:30mPa.s羧甲基纤维素钠 粘度: 800-1200mpa.s ,USP级N-cadherin N-钙粘附分子抗原
S100B蛋白检测试剂盒羟基纤维素 2%粘度50mPa.s;甲氧基28-30%;羟基7.0-12%羧甲基纤维素钠 粘度:≥1200mpa.s,USP级E-cadherin E-钙粘附分子抗原
S100蛋白检测试剂盒羟基纤维素 I型,粘度:100mPa.s羧甲基纤维素 粘度: 600-1000mpa.s,USP级Nephrin Protein 去氧肾上腺素
S100钙结合蛋白A4检测试剂盒羟基纤维素 I型,粘度:400mPa.s羧甲基淀粉钠 ARNeurocan 神经粘蛋白抗原
S100钙结合蛋白A8检测试剂盒羟基纤维素 I型,粘度:4000mPa.s羧甲基淀粉钠 药用级NF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神经纤维瘤抗原
S100钙结合蛋白A8;A9复合物检测试剂盒羟基纤维素 I型,粘度:20000mPa.s糊精 ARNFATc1 活化T核因子1蛋白
S100钙结合蛋白A9检测试剂盒羟基纤维素 II型,粘度:100mPa.s可溶性淀粉 ARphospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 磷酸化核因子/磷酸化k基因结合核因子抗原
SH3YL1检测试剂盒羟基纤维素 II型,粘度:400mPa.s水溶性淀粉 水溶性,药用级NF-κBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB) 核因子50/κ基因结合核因子50抗原
大鼠β素(BTC)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PTGES(Prostaglandin E synthase) ELISA Kit巨噬炎性蛋白抗体
大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CHAD(Chondroadherin) ELISA KitCD72蛋白抗体
大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SNAP25(Synaptosomal-associated protein 25) ELISA Kit中心体蛋白128抗体
大鼠β内啡肽受体(β-EPR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SLC50A1(Sugar transporter SWEET1) ELISA Kit着丝粒蛋白O抗体
大鼠β内啡肽(β-EP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TTPAL(Alpha-tocopherol transfer protein-like) ELISA Kit3号染色体开放阅读框17抗体
大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(BID)酶联免疫吸附测定试剂盒Human HSPE1(10 kDa heat shock protein, mitochondrial) ELISA Kit质膜微囊蛋白-2抗体
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
乙型流感病毒Yamagata检测试剂盒、荧光PCR法大鼠BCL-2相关死亡促进因子(BAD)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NFE2L1(Nuclear factor erythroid 2-related factor 1) ELISA Kit巨噬炎性蛋白15
实验注意事项: