禽流感病毒H5/H7/H9亚型检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

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禽流感病毒H5/H7/H9亚型检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63745


柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

基质金属蛋白酶抑制因子1检测试剂盒异戊 99%PH标准缓冲溶液 pH=6.86±0.02 (25℃)DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT)  DISC1 C端抗原

基质金属蛋白酶抑制因子2检测试剂盒正 standard for GC,>99.5%(GC)PH标准缓冲溶液 pH=7.00±0.02 (25℃)DR3/TRAMP (death receptor-3)  DR3 死亡受体(抗原)

基质金属蛋白酶抑制因子3检测试剂盒正 98%氨-氯化铵缓冲溶液 pH≈10E7 protein/HPV 16 (Human illomavirus type 16)  人瘤病16型E7蛋白抗原

基质金属蛋白酶抑制因子4检测试剂盒正 99%氢氧化钠标准溶液 1.000mol/L (1N)EGF-R (Epidemal growth factor receptor)  表皮生长因子受体(抗原)

基质衍生因子1检测试剂盒三乙 AR,99.0%氢氧化钠标准溶液 0.5000mol/L (0.5N)Eukaryotic aspartyl protease(Rice)  天冬氨酸蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一种)(抗原)

基质衍生因子1α检测试剂盒三乙 for HPLC, ≥99.5% (GC)氢氧化钠标准溶液 0.2000mol/L (0.2N)FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor)  一种*的胰岛因子(抗原)

基质相互作用分子1检测试剂盒三正 GR,99%氢氧化钠标准溶液 0.1000mol/L (0.1N)Fabp2 (fatty acid binding protein 2, intestinal)  脂肪酸结合蛋白2(抗原)

激活素A检测试剂盒三正 CP,98.0%硫酸标准溶液 0.5000mol/L(1N)ECG2 (sophagus cancer-related gene-2)  食道癌相关基因(抗原)

激活素B检测试剂盒三正丁 GCS, ≥99.5% (GC)硫酸标准溶液 0.2500mol/L(0.5N)Fibronectin (FN)  纤维连结蛋白(多肽抗原)

低密度脂蛋白检测试剂盒三正丁 99.5%硫酸标准溶液 0.05000mol/L(0.1N)FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor)  成纤维生长因子-7/纤维母生长因子 (抗原)

几丁质酶3检测试剂盒三正丁 CP,98%  硫代硫酸钠标准溶液 0.1000mol/LFGFR1 peptide  碱性成纤维生长因子受体-1(多肽抗原)

几丁质酶3样蛋白3检测试剂盒甲基烯酸异丁酯  99%,含15 - 20 ppm MEHQ稳定剂银标准溶液 1000μg/mlFGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2)  成纤维生长因子受体2抗原

己糖激酶检测试剂盒1-(2-吡啶基)哌 97%银标准溶液 100μg/mlFGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8)  成纤维生长因子-8/纤维母生长因子-8 (抗原)

己糖激酶2检测试剂盒琼脂糖 for biochemistry 硝酸银标准溶液 0.1000mol/L(0.1N)GAD-65 (glutamate decarboxylase)  谷氨酸脱羧酶-65(C端多肽)

甲胎蛋白检测试剂盒琼脂糖 低熔点,适用于分离小的核酸片段硝酸银标准溶液 0.01000mol/L(0.01N)GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease )   3-磷酸甘油脱氢酶(抗原)
禽流感病毒H5/H7/H9亚型检测试剂盒、荧光PCR法大鼠补体成分3a(C3a)酶联免疫吸附测定试剂盒Human EFNA1(Ephrin-A1) ELISA KitDIRAS2蛋白抗体

大鼠补体成分4a(C4a)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TCF4(Tranion factor 4) ELISA KitDDX58抗体

大鼠补体成分5a(C5a)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PLD1(Phospholipase D1) ELISA KitDDX4抗体

大鼠结缔组织生长因子(CTGF)酶联免疫吸附测定试剂盒Human YRDC (YrdC domain-containing protein, mitochondrial) ELISA KIT鸭瘟病DPV抗体

大鼠连接蛋白26(CX26)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ITIH5L(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H5-like protein) ELISA Kit交联纤维蛋白二聚体抗体

大鼠连接蛋白31(CX31)酶联免疫吸附测定试剂盒Human S100A4(Protein S100-A4) ELISA Kit脑发育调节蛋白抗体

大鼠连接蛋白37(CX37)酶联免疫吸附测定试剂盒Human GCLC(Glutamate-cysteine ligase catalytic subunit) ELISA KitDNA断裂因子抗体(蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶)

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