嗜肺军团菌检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

产品名称

规格

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货号

嗜肺军团菌检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63791


柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

β2糖蛋白1IgG抗体检测试剂盒五氯化锑 CP(剧品)硫化亚铁 Fe,60.0 - 72.0 %Ret IL-12 P40  大鼠白介素-12p40

载脂蛋白H检测试剂盒己二酸二甲酯 CP,98%氢氧化铁 CPPI3K  大鼠磷脂酰肌激酶

载脂蛋白H抗体检测试剂盒癸二酸二甲酯 97%四氧化三铁 97%Rat Caspase-1  大鼠Caspase-1

P38蛋白检测试剂盒间苯二甲酸二甲酯 99%四氧化三铁 99.99% ls basisRat Caspase-2  大鼠Caspase-2

P53蛋白检测试剂盒间苯二甲酸二甲酯 色谱固定液草酸亚锡 CPRat Caspase-3  大鼠Caspase-3

糖链抗原125检测试剂盒二乙基锌 1.0 M in Hexane2,6-二异基苯酚 98%Rat Caspase-6  大鼠Caspase-6

糖链抗原153检测试剂盒三乙基铝 1.0 M 正己烷溶液4-硝基 CPRat Caspase-7  大鼠Caspase-7

C型钠尿肽检测试剂盒三甲基铝 2.0 M 甲苯溶液4-硝基 98%Rat Caspase-8  大鼠Caspase-8

趋化素样因子1检测试剂盒三甲基铝 2.0 M 正己烷溶液还原铁粉 AR,100目Rat Caspase-9  大鼠Caspase-9

噻唑兰检测试剂盒石英比色皿 124mm*124mm*450mm还原铁粉 CP,100目Ret AEA IgM ELISA Kit  抗大鼠内膜抗体IgM

L(+)-3-羟脂酰辅酶A脱氢酶检测试剂盒氘代酮 (D,99.8%) + TMS (0.03%)1-甲基-2-苯基吲哚 99%Ret IgG ELISA Kit  大鼠免疫球蛋白G

检测试剂盒氘代酮 (D, 99.96%) (+0.03% V/V TMS)N,N-二甲基对苯二硫酸盐 AR,98.0%Ret IgM ELISA Kit  大鼠免疫球蛋白M

脂酰COA脱氢酶检测试剂盒氘代酮 (D,99.9%)0.98

圆环病2型抗体检测试剂盒氘代乙 (D,99.8%)米吐尔 AR,99.0%IL-1 Alpha  小鼠白介素-1α

脑红蛋白检测试剂盒乙酸-D4 (D, 99.5%)辣椒碱 分析标准品,≥95%(HPLC),天然IL-1 Alpha  小鼠白介素-1α
嗜肺军团菌检测试剂盒、荧光PCR法大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human DHTKD1 (Probable 2-oxoglutarate dehydrogenase E1 component DHKTD1, mitochondrial) ELISA KIT精神分裂症易感基因抗体

大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PROKR1 (Prokineticin receptor 1) ELISA KIT蓬乱蛋白1抗体

大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PIPOX (Peroxisomal sarcosine oxidase) ELISA KIT肌Dystrobrevin β蛋白抗体

大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ADCYAP1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide) ELISA Kit异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原抗体

大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PROSER1 (Proline and serine-rich protein 1) ELISA KIT结蛋白抗体

大鼠全段甲状旁腺素(I-PTH)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PLAC1 (Placenta-specific protein 1) ELISA KITDISC1 C端抗体

大鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PRLR(Prolactin receptor) ELISA KitDISC1 N端抗体

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