百日咳杆菌检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

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百日咳杆菌检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63795

操作流程:

收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

瓜氨酸检测试剂盒苯磺酰 98%10-十一烯酸 98%sTNF Alpha-RII(humen)  小鼠可溶性肿瘤坏死因子-受体2

前胰岛素原检测试剂盒二苯砜 97%过氧化二叔丁基 97%TGF Beta 2  小鼠转化生长因子 β 2

血钙检测试剂盒苯磺酸钠 97%500mlZPA玻璃瓶真空包装袋 280*140*0.1TGF Beta 1  小鼠转化生长因子 β 1

血磷检测试剂盒3-乙酯 98%1L玻璃瓶包装用真空塑料袋 355*180mmEGF  小鼠表皮生长因子

α2巨球蛋白检测试剂盒 AR,95%包装用透明PE袋 345*345*0.1mmEGFR  小鼠表皮生长因子受体

鸢尾素检测试剂盒0.99100ml 注射剂瓶用透明PE袋 230*110*0.1mmERK1 mouse  小鼠丝裂原活化蛋白激酶1

系统性组织蛋白酶b检测试剂盒 99.95% ls basis苯并(a)蒽 98%mouse-VEGF/ELISA  小鼠血管内皮生长因子

β2糖蛋白1检测试剂盒五硫化二锑 锑含量:66%丹皮酚 99%mouae-VEGF-D  小鼠血管内皮生长因子D

β2糖蛋白1IgG抗体检测试剂盒硫化锑 98%10-十一烯酸 95%VEGF-R1  小鼠血管内皮生长因子受体1

胃肠癌标志物CA199检测试剂盒Symbol 采集器 MC3000 主机 电池 数据线10-十一烯酸 98%VEGF-R2  小鼠血管内皮生长因子受体2

胰腺癌标志物-CA242检测试剂盒NETCE软件己二酸二异辛酯 99%UPAR  小鼠尿激酶样纤溶酶原活化物受体

肿瘤标志物检测试剂盒(R)-(-)-2-氯扁桃酸 98%己二酸二异辛酯 分析标准品TH1/TH2  小鼠内因子

谷胱甘肽转硫酶mu5检测试剂盒邻氯扁桃酸 98%癸二酸二辛酯  Standard for GC, ≥98.5% (GC)HLA-G  小鼠白抗原G

谷胱甘肽还原酶检测试剂盒3,4-二乙酮 98%癸二酸二辛酯 AR,97.0%CTGF  小鼠结缔组织生长因子

血糖检测试剂盒苯甲酰乙酸乙酯 95%癸二酸二辛酯 CP,95.0%MIP-1 Alpha  小鼠巨噬炎性蛋白-1α
百日咳杆菌检测试剂盒、荧光PCR法大鼠白介素9(IL-9)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PDIK1L (Serine/threonine-protein kinase PDIK1L) ELISA KIT蓬乱蛋白2抗体

大鼠白介素11(IL-11)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PELI3 (E3 ubiquitin-protein ligase pellino homolog 3) ELISA KIT磷酸化蓬乱蛋白2抗体

大鼠白介素13(IL-13)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MYH11(Myosin-11) ELISA Kit转录下调蛋白1抗体

大鼠白介素15(IL-15)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PROCA1 (Protein PROCA1) ELISA KIT脱氢酶/还原酶家族成员2抗体

大鼠白介素16(IL-16)酶联免疫吸附测定试剂盒Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) ELISA KIT牙本质磷蛋白抗体

大鼠白介素17(IL-17)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PPP1R13B (Apoptosis-stimulating of p53 protein 1) ELISA KITDermokine β蛋白抗体

大鼠白介素18(IL-18)酶联免疫吸附测定试剂盒Human POMK (Protein O-mannose kinase) ELISA KITDPCR1蛋白抗体
实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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