百日咳杆菌和副百日咳杆菌检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

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百日咳杆菌和副百日咳杆菌检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63823

操作流程:

收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

几丁质酶3样蛋白1检测试剂盒1-氯代萘 96%正癸烷 98%HL(Human hepatic lipase) ELISA Kit  人肝脂酶

微管相关蛋白轻链3I检测试剂盒3-氯苯甲 98%十二烷 98%HPA(Human Heparanase) ELISA kit  人乙酰肝素酶

瓜氨酸组蛋白H3检测试剂盒联苯单乙酮  98%十二烷 Standard for GC,≥99.5% (GC)HELIX- II (Human type II collagen helical peptide) ELISA Kit  人Ⅱ型胶原螺旋肽

Ⅳ型肽精氨酸脱亚氨基酶检测试剂盒2-氯-4'-苯基苯乙酮 99%十四烷 98%FRA(Human fibronection related antigen) ELISA Kit  人纤维连接素相关抗原

ATP合成酶检测试剂盒3,4-二甲基二苯甲酮 99%十四烷 99%GCA(Human gastrin cell antibody) ELISA Kit  人胃泌素抗体

Lys63特异性去泛素化酶BRCC36检测试剂盒4,4'-二氯二苯甲酮 分析标准品十四烷 Standard for GC,>99%(GC)GDH/GLDH(Human Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit  人谷氨酸脱氢酶

脂磷壁酸检测试剂盒4,4'-二氯二苯甲酮 99%十四烷 分析标准品, ≥99.5% (GC)HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit  人肝素辅因子Ⅱ

补体蛋白1检测试剂盒4-乙氧基苯乙酮 98%十四烷 无烯烃, ≥99.0% (GC)CA(Human Cholic acid) ELISA Kit  人胆酸

补体蛋白5检测试剂盒4-氟苯乙酮 98%十三烷 Standard for GC,>99%(GC)Hp-IgG(Human Helicobacter pylori IgG ) ELISA Kit  人幽门螺旋菌IgG

补体蛋白2检测试剂盒对羟基苯酮  98%十三烷 98%GGT(Human gamma glutamyl transpeptidase) ELISA Kit  人γ谷氨酰转移酶

补体蛋白5b-9检测试剂盒4-甲氧基苯乙酮 99%十三烷 99%GM(Human Gastric Mucin) ELISA Kit  人胃粘液素

色氨酸检测试剂盒4,4'-二氟二苯甲酮 99%十三烷 分析标准品,>99.5% (GC)HABP(Human Hya]uronate binding protein) ELISA Kit  人透明质酸结合蛋白

内皮特异性分子检测试剂盒2-甲基乙酰苯酮 98%十一烷 98%NTX(Human cross ed N-opeptide of type I collagen) ELISA Kit  人Ⅰ型胶原N末端肽

羟赖氨酸吡啶啉检测试剂盒4'-乙酮 99%维生素B6 99%Hp-IgM(Human Helicobacter pylori IgM) ELISA Kit  人幽门螺旋杆菌IgM

基质金属蛋白酶12检测试剂盒二氢芳樟 95%Amberlyst® 15离子交换树脂 湿CagA(Human Cytotoxin-associated protein) ELISA Kit  人素相关蛋白A
百日咳杆菌和副百日咳杆菌检测试剂盒、荧光PCR法大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SEMG2(Semenogelin-2) ELISA Kit磷酸化eIF4E结合蛋白抗体

大鼠III型前胶原氨基端肽(PIIINP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human LMCD1 (LIM and cysteine-rich domains protein 1) ELISA KIT磷酸化eIF4E结合蛋白抗体

大鼠孕激素/孕酮(Pg)酶联免疫吸附测定试剂盒Human LYRM1 (LYR motif-containing protein 1) ELISA KIT内皮特异性分子1抗体

大鼠孕酮受体(PGR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human LMO1 (Rhombotin-1) ELISA KIT真核翻译起始因子3F抗体

大鼠卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human KDM1A(Lysine-specific histone demethylase 1A) ELISA Kit真核翻译起始因子3H抗体

大鼠阻抑素(PHB)酶联免疫吸附测定试剂盒Human LMO2 (Rhombotin-2) ELISA KIT真核翻译起始因子4G抗体

大鼠胰岛素原(PI)酶联免疫吸附测定试剂盒Human LPGAT1 (Acyl-CoA:lysophosphatidylglycerol acyltransferase 1) ELISA KITβ4整合素结合蛋白抗体
实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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