肠道病毒68型检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

产品名称

规格

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货号

肠道病毒68型检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63829


柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

his标签蛋白检测试剂盒Koser氏枸椽酸盐肉汤 BR卵磷脂 from soybean,>70%EBMZ(Human epidermal ment membrane zone) ELISA Kit  人抗表皮基底膜抗体

磷酸化环磷酸腺苷检测试剂盒LB肉汤 BR对甲酚 98%ACA(Human anti-centrol and centrosome antibody) ELISA Kit  人抗中性粒/中心体抗体

免疫球蛋白A抗体检测试剂盒LB琼脂 BR混合甲酚 CPAAA(Human anti-albumin antibody) ELISA Kit  人抗白蛋白抗体

破伤风IgG检测试剂盒乳糖蛋白胨培养液 BR2,6-二叔丁基对甲酚 CP,98%PCA-1/Yo(Human purkinje cell autoantibody) ELISA Kit  人抗浦肯野抗体/抗Yo抗体

血管生成素1检测试剂盒LEB增菌液 BR对甲苯磺酸,—水 AR,99%Human anti-Sa-antibody ELISA Kit  人抗Sa抗体

免疫球蛋白G a2检测试剂盒李氏增菌液基础 BRDL-氨酸 99%ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit  人抗神经元核抗体2型/抗Ri抗体

内质网氨基肽酶1检测试剂盒水解乳蛋白 BRDL-氨酸 ≥99%, FCChnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody) ELISA Kit  人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体

乙酰辅酶A检测试剂盒麦芽浸膏 BR甘氨酸 AR,99.5-100.5%anti-Q-Ab(Human anti-Q fever antibody) ELISA Kit  人抗Q热抗体

辅酶A-SH检测试剂盒麦芽汁琼脂培养基 BR甘氨酸 分析标准品PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit  人抗多发性肌炎硬皮病抗体

N-酰辅酶A检测试剂盒霉菌液体培养基 BR甘氨酸  药典级,Ph. Eur., BP, USP, 99-101%Human anti-PL7-antibody ELISA Kit  人PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成酶

琥珀酰辅酶A检测试剂盒麦芽浸膏汤 BR甘氨酸 用于电泳, ≥99%PL12/AlaRS(Human anti-PL12-antibody) ELISA Kit  人PL12抗体/抗氨酰tRNA合成酶

组蛋白检测试剂盒MUGal肉汤 BR甘氨酸 用于分子生物学, ≥99.0% (NTHuman anti-Mi2-antibody ELISA Kit  人抗Mi2抗体

抗核糖体P蛋白抗体检测试剂盒改良E.C新生霉素增菌肉汤基础 BRL-组氨酸 99%Human anti-Ku-antibody ELISA Kit  人抗Ku抗体

载脂蛋白E2检测试剂盒MFC培养基 BRL-赖氨酸 98%Human anti-IgA antibody ELISA Kit  人抗IgA抗体

载脂蛋白E4检测试剂盒甘露发酵培养基 BR变色酸2R ARANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit  人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体
肠道病毒68型检测试剂盒、荧光PCR法大鼠蛋白激酶1(PK D1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human LMNA(Lamin-A) ELISA KitCAST1蛋白抗体

大鼠蛋白激酶2(PK D2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human BAG6(Large proline-rich protein BAG6) ELISA KitRAB6蛋白抗体

大鼠蛋白激酶抑制剂α(PKIA)酶联免疫吸附测定试剂盒Human THOP1(Thimet oligopeptidase) ELISA Kit皮卡丘素抗体

大鼠蛋白激酶抑制剂β(PKIB)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FTMT(Ferritin, mitochondrial) ELISA KitELAVL4蛋白抗体

大鼠蛋白激酶抑制剂γ(PKIG)酶联免疫吸附测定试剂盒Human LTBP4 (Latent-transforming growth factor beta-binding protein 4) ELISA KIT表皮生长因子样激素受体1

大鼠蛋白激酶1(PKIN1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human KDELC1 (KDEL motif-containing protein 1) ELISA KIT磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

大鼠AMP活化蛋白激酶α1(PRKAA1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human INIP (SOSS complex subunit C) ELISA KIT电子转移黄素蛋白α抗体

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