本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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柯萨奇病毒A2型检测试剂盒、荧光PCR法 |
50T |
详见说明书 |
BH-P63833 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
M2型酮酸激酶检测试剂盒西蒙氏柠檬酸盐培养基 BR酚酞 98%PA-IgG/M/A(Human plaet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit 人抗血小板抗体IgG/M/A
凝血因子Ⅷ检测试剂盒0.5%无菌TTC溶液 BR酚酞 Ph Eur., BP, 98-101%ALG(Human anti-lymphocyte globulin) ELISA Kit 人抗淋巴球蛋白
亚铁螯合酶检测试剂盒盐增菌液 BR6-氨基己酸 99%AT(Human Anti-trypsin) ELISA Kit 人抗胰蛋白酶
ABO组织血型系统转移酶检测试剂盒pH7.0-蛋白胨缓冲液 BR盐酸石蒜碱 96%(HPLC)ARPA/Rib-P(Human anti-ribosomal P protein antibody) ELISA Kit 人抗核糖体P蛋白抗体
己糖激酶1检测试剂盒大豆蛋白胨 BR维生素K1 98%ASA(Human Anti-Somatic Muscle Antibody) ELISA Kit 人抗骨骼肌抗体
蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型11检测试剂盒胰蛋白胨 BR磷酸二氢铵 AR，99%TAb(Human Thyroid Antibody) ELISA Kit 人甲状腺抗体
葡萄糖6磷酸异构酶检测试剂盒胰蛋白胨大豆肉汤 BR磷酸二氢铵 CP，98.5%ICA(Human islet cell antibody) ELISA Kit 人胰岛抗体
己糖激酶检测试剂盒胰蛋白胨大豆琼脂培养基 BR磷酸二氢铵 SPSDA(Human salivary duct autoantibody) ELISA Kit 人抗唾液腺导管组织抗体
信号转导与转录激活因子1检测试剂盒胰化大豆琼脂 BR磷酸二氢铵 ≥99.99%
血红素检测试剂盒TTC营养琼脂 BR磷酸二氢铵 用于植物培养，≥99.0%AKA(Human Anti-keratin antibody) ELISA Kit 人抗角蛋白抗体
凝血酶原片段F1+2检测试剂盒四硫磺酸钠煌绿增菌液基础 BR分析标准品, 用于凯氏定氮法氮测定， ≥99.5%pANCA(Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒核周抗体
酪氨酸羟基转移酶检测试剂盒胰酪胨大豆肉汤 BR磷酸二氢铵 for HPLC, ≥99.0% (T)cANCA(human anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒胞浆抗体
CD44分子检测试剂盒胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂 BR磷酸二氢铵 ACS, ≥98%aPT1/aPT2(Human anti-prothrombins antibodies) ELISA Kit 人抗凝血素抗体
中性粒弹性蛋白酶检测试剂盒胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤 BR磷酸氢二铵 AR,98.5%PI Ab-IgG/IgM(human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 人磷脂酰肌抗体IgG/IgM
分泌型免疫球蛋白G检测试剂盒胰蛋白月示-亚硫酸盐-琼脂培养基 BR磷酸氢二铵 CP,98.0%Beta2-GP1 IgA/G/M(Human Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M
柯萨奇病毒A2型检测试剂盒、荧光PCR法大鼠G蛋白信号调节蛋白4(RGS4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TTPA(Alpha-tocopherol transfer protein) ELISA Kit磷酸化埃兹蛋白抗体
大鼠松弛/胰岛素样家族肽受体1(RXFP1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human IQUB (IQ and ubiquitin-like domain-containing protein) ELISA KIT磷酸化埃兹蛋白抗体
大鼠呼吸道合胞病IgA(RSV-IgA) 酶联免疫吸附测定试剂盒Human HCRTR2 (Orexin receptor type 2) ELISA KIT磷酸化转录因子ELK1抗体
大鼠呼吸道合胞病IgD(RSV- IgD) 酶联免疫吸附测定试剂盒Human IL1F10(Interleukin-1 family member 10) ELISA Kit磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受体抗体
大鼠呼吸道合胞病IgG(RSV- IgG) 酶联免疫吸附测定试剂盒Human ISLR (Immunoglobulin superfamily containing leucine-rich repeat protein) ELISA KITEphrin B抗体
大鼠呼吸道合胞病IgM(RSV- IgM)酶联免疫吸附测定试剂盒Human IGFN1 (Immunoglobulin-like and fibronectin type III domain-containing protein 1) ELISA KIT磷酸化Ephrin B抗体
大鼠视黄结合蛋白4(RBP4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ADRA1A(Alpha-1A adrenergic receptor) ELISA Kit磷酸化Ephrin B抗体
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
