柯萨奇病毒B4检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

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柯萨奇病毒B4检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63839

操作流程:

收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

M2型酮酸激酶检测试剂盒2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮 99%1,4-苯醌二肟 96%CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) ELISA Kit  人囊虫病抗体

连蛋白检测试剂盒2-甲氧基乙氧基氯 95%双(4-溴苯基) 98%Brucella Ab IgG(Human Brucella Antibody IgG) ELISA Kit  人布鲁氏菌抗体IgG

二氧化酶检测试剂盒间磺酸钠 95%5-溴-1,2,3-三甲氧基苯 97%VZV-IgM(Human Varicella zoster virus IgM ELISA Kit  人水痘带状疱疹病IgM

谷转氨酶检测试剂盒间磺酸钠 99%2-叔丁基-4-乙基苯酚 98%VZV-IgG(Human Varicella zoster virus IgG) ELISA Kit  人水痘带状疱疹病IgG

谷胱甘肽巯基转移酶检测试剂盒乙酰乙酸异酯 98%三氟化乙络合物 97%LP Ab-IgA(Human Legionella antibody IgA) ELISA Kit  人军团菌抗体IgA

谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒乙酰乙酸甲氧乙酯 96%亚硝酸叔丁酯 90%LP Ab-IgM (Human Legionella antibody IgM) ELISA Kit  人军团菌抗体IgM

乙脱氢酶家族1-A3检测试剂盒间甲 98%3-溴氢盐 97%LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG) ELISA Kit  人军团菌抗体IgG

雌三检测试剂盒酵母浸粉 BR3-环戊基酰氯 98%Human paramyxovirus parotitis IgM ELISA Kit  人腮腺炎病IgM

氨基乙二酸半合酶检测试剂盒酵母浸膏 BR5-氯戊酰氯 98%Human paramyxovirus parotitis IgG ELISA Kit  人腮腺炎病IgG

上皮性钙黏附蛋白检测试剂盒3-氨基三甲氧基硅烷 97%3-氯盐酸盐 98%EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM) ELISA Kit  人EB病IgM

桩蛋白检测试剂盒3-氨基三乙氧基硅烷 99%1,5-二氟-2,4-二 97%EBv IgA(Human epstein-barr virus IgA) ELISA Kit  人EB病IgA

5-羟色受体4检测试剂盒3-氨基三乙氧基硅烷 98%内消旋-2,3-二巯基丁二酸 98%EBv IgG(Human epstein-barr virus IgG) ELISA Kit  人EB病IgG

孕酮受体检测试剂盒四氧基硅烷 97%2-氧代-4-苯基丁酸乙酯 92%Human Leishimaria antibody ELISA Kit  人利什曼原虫抗体

II型胶原自身抗体检测试剂盒甲基三甲氧基硅烷 98%3-苯甲酰基烯酸乙酯 94%DF-Ab(Human dengue fever antibody) ELISA Kit  人登革热抗体

血管紧张素转化酶检测试剂盒四甲氧基硅烷 98%2-乙基丁酸 99%FLU(Human Influenza viruses IgG) ELISA Kit  人流感病抗体IgG
柯萨奇病毒B4检测试剂盒、荧光PCR法大鼠白介素2可溶性受体(IL-2SR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human HYPK (Huntingtin-interacting protein K) ELISA KIT内皮素3抗体

大鼠白介素6受体(IL-6R)酶联免疫吸附测定试剂盒Human HEPACAM2 (HEPACAM family member 2) ELISA KIT磷酸化外信号调节激酶5抗体

大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1SRⅠ)酶联免疫吸附测定试剂盒Human HGSNAT (Heparan-alpha-glucosaminide N-acetyltransferase) ELISA KIT磷酸化外信号调节激酶5抗体

大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1SRⅡ)酶联免疫吸附测定试剂盒Human HAVCR2 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) ELISA KIT外信号调节激酶4抗体

大鼠白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)酶联免疫吸附测定试剂盒Human HNRNPM (Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M) ELISA KIT肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体

大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2SRβ)酶联免疫吸附测定试剂盒Human JUN(Tranion factor AP-1) ELISA Kit磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体

大鼠可溶性血小板内皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NHLH2 (Helix-loop-helix protein 2) ELISA KITCD312抗体
实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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