本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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埃博拉病毒检测试剂盒、双重荧光PCR法 |
50T |
详见说明书 |
BH-P64003 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
前列腺素检测试剂盒邻苯二甲酸氢钠 AR,99.8%钆标准溶液 1000µg/mL,基体:10%HClAnti- Beta-Actin/FITC 荧光素标记β-肌动蛋白抗体IgG
抗抗体检测试剂盒硝酸锶 99.99%
胰岛素样生长因子3检测试剂盒硝酸锶 AR,99.5%钬标准溶液 1000μg/mlAnti- Alpha-ACTN4/FITC 荧光素标记抗α-辅肌动蛋白4抗体IgG
胰岛素样因子3检测试剂盒焦硫酸钠 AR,96.0%钬标准溶液 1000μg/mL,基体:10%HCLAnti-ADAM-TS1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型抗体IgG
白介素12β检测试剂盒硫代硫酸钠 99.99%
抗鹅细小病检测试剂盒硫化钠 AR,≥98.0%硬度标准溶液 1000μg/ml,硬度Anti-ADAM-TS7/FITC 荧光素标记整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体IgG
卵清蛋白特异性IgG抗体检测试剂盒硫化钠 CP,≥96.0%水硬度标准溶液 45.0mmol/l(以CaCO3计),基体:0.1mol/L HClAnti-14-3-3 family protein/FITC 荧光素标记植物14-3-3蛋白抗体IgG
卵清蛋白特异性IgA抗体检测试剂盒硫化钠 ACS铁标准溶液 1000μg/mlAnti-ADAM-TS7/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7(N端)抗体IgG
脂多糖特异性IgA抗体检测试剂盒氟硅酸钠 AR,98%铁标准溶液 1000mg/L,溶剂:1%盐酸Anti-ADAM-TS12/FITC 荧光素标记整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体IgG
组蛋白去乙酰化酶检测试剂盒氟硅酸钠 CP,97%铁标准溶液 500mg/L,溶剂:1%盐酸Anti-ACV-A/FITC 荧光素标记活化素A抗体IgG
硫氧还蛋白相互作用蛋白检测试剂盒次氯酸钠溶液 AR,6-14% active chlorine basis100μg/mL(20°C),基体:5%HClAnti-Adducin protein/FITC 荧光素标记内收蛋白抗体IgG
叉头型基因A2检测试剂盒碳酸锶 99.95%
胰岛淀粉样多肽检测试剂盒氨基磺酸 AR,99.5%铁标准溶液 100μ/mlAnti-ADFP/ADRP/adipophilin/FITC 荧光素标记脂肪组织分化相关蛋白抗体IgG
III型胶原蛋白检测试剂盒氨基磺酸 99.99%
山梨脱氢酶检测试剂盒氨基磺酸 ACS级,滴定标准物质铟标准溶液 100mg/L(20℃),基体:1%HClAnti-ADH/AVP/FITC 荧光素标记抗利尿激素/血管升压素抗体IgG
埃博拉病毒检测试剂盒、双重荧光PCR法猪前胶原C端肽酶(PCP)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TRIB2 ELISA KitTuberin样蛋白1抗体
猪α羟基丁酸脱氢酶(αHBDH)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TRIM11 ELISA KitX连锁Charcot-Marie-Tooth变相关蛋白抗体
猪蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M2(M-AChRM2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SRSF3(Serine/arginine-rich splicing factor 3) ELISA Kit甘氨酰核苷酸合成酶抗体
猪碳酸酐酶VB(CA5B)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TRIM15 ELISA Kit生长休止特定蛋白2抗体
猪P62抗体(AP62A)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TRIM14 ELISA KitG蛋白γ11/Gγ11 抗体
猪着丝粒蛋白I(CENPI)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TRIM17 ELISA Kit磷酸化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体
猪核糖体蛋白L10(RPL10)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TRIM23 ELISA Kitγ-谷氨酰转肽酶7重链抗体
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR