本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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解脲脲原体检测试剂盒、荧光PCR法 |
50T |
详见说明书 |
BH-P64061 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
a-羟丁酸脱氢酶检测试剂盒苯 AR, ≥99.5%2,2'-双(二苯基磷)联苯 98%Anti-DRADA/ADAR1/FITC 荧光素标记双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体IgG
脂肪酸结合蛋白检测试剂盒苯 for HPLC, ≥99.7%1,2-双(二甲基膦)乙烷 97%Anti-DRADA/ADAR1/FITC 荧光素标记双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体(N端)IgG
肿瘤坏死因子配体家族成员11检测试剂盒环己酮 CP,99.0%1,1'-双(二异基膦)二茂铁 98%Anti-DTNB/FITC 荧光素标记肌Dystrobrevin β蛋白抗体IgG
氨甲酰磷酸合成酶检测试剂盒环己酮 99.8%4,6-二(二苯基膦)吩 98%Anti-DTNBP1 /FITC 荧光素标记精神分裂症易感基因抗体IgG
骨特异性碱性磷酸酶检测试剂盒N,N-二甲基乙酰 ≥99.8%双(1,5环辛二烯)的镍(0) 96%Anti-dUTPase/FITC 荧光素标记抗脱氧尿嘧啶三磷酸核苷水解酶抗体IgG
氨甲酰磷酸合成酶1检测试剂盒邻二氯苯 98%二氯化双(三环己基膦)镍(II) 97%Anti-DVL1 /FITC 荧光素标记蓬乱蛋白1抗体IgG
顶体酶检测试剂盒二乙 AR,99.0%双(环戊二烯)镍(II) 98%Anti-DVH/FITC 荧光素标记鸭病性肝炎抗体IgG
二酰基甘油酰基转移酶1检测试剂盒二水溶液 AR,40 wt. % in H2O双(六氟乙基酮)合镍(II),水合 96%Anti-FLAG Tag (NT)/FITC 荧光素标记抗标签FLAG Tag标签抗体(N端)IgG
二酰基甘油酰基转移酶2检测试剂盒二氯 Standard for GC,≥99.9% (GC)双(三苯基膦)氢化亚铜 90%Anti-K3/FITC 荧光素标记抗K3蛋白抗体IgG
富亮氨酸α2糖蛋白1检测试剂盒二氯 AR,99.5%,含50-150ppm异戊烯稳定剂苄基二苯基膦 99%Anti-FLAG Tag (CT)/FITC 荧光素标记FLAG Tag标签抗体(C端)IgG
C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3检测试剂盒二氯 CP,99.0%1, 2-双(二环己基磷基)-乙烷 98%Anti-FLAG Tag (CT)/HRP 辣根过氧化物酶标记 FLAG Tag标签抗体(C端)IgG
血小板反应蛋白;凝血酶敏感蛋白1检测试剂盒二氯 for HPLC, ≥99.9%,含50-150ppm异戊烯稳定剂双(二环己基膦) 97%Anti-FLAG Tag(CT)/FITC 荧光素标记FLAG Tag标签抗体(C端)IgG
血小板反应蛋白;凝血酶敏感蛋白检测试剂盒二氯 for GC,≥99.8%,含50-150ppm戊烯稳定剂1,3 -双(二环己膦基)烷 95%Anti-FLAG Tag(CT)/HRP 辣根过氧化物酶标记FLAG Tag标签抗体(C端)IgG
吲哚2,3-双加氧酶1检测试剂盒二氯 ACS, ≥99.8%,含50-150ppm戊烯稳定剂 1,2-双[双(五氟苯基)膦基]乙烷 97%Anti-Dynamin 2/FITC 荧光素标记兔抗人鸟苷三磷酸酶-发动蛋白2抗体IgG
CD206分子检测试剂盒二氯 ACS , ≥99.5%1,1'-二(二环己基膦)-二茂铁 97%Anti-Nadrin/FITC 荧光素标记Nadrin抗体IgG
解脲脲原体检测试剂盒、荧光PCR法猪金属硫蛋白1E (MT1E)酶联免疫吸附测定试剂盒Human STXBP2 ELISA KitHA tag标签抗体
猪糖皮质激素受体β(GRβ)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human STT3B ELISA Kit缺氧诱导基因1蛋白抗体
猪C型凝集素结构域家族2成员C(CLEC2C)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human STXBP1(Syntaxin-binding protein 1) ELISA Kit人绒毛膜促性腺激素α 亚基单抗
猪血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)酶联免疫吸附测定试剂盒Human STOML1 ELISA Kit人乙型肝炎表面抗原单克隆抗体(检测)
猪抗神经节苷脂M1抗体(Anti-GM1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human STK4 ELISA Kit人乙型肝炎e抗原单克隆(包被)抗体
猪肝癌抗原(PHC)酶联免疫吸附测定试剂盒Human STOM(Stomatin) ELISA Kit人乙型肝炎e抗原单克隆(检测)抗体
猪肌腱蛋白C(TNC)酶联免疫吸附测定试剂盒Human STK16 ELISA Kit小鼠抗人血红蛋白单克隆抗体
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR