实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素，经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值，计算样品浓度。
产品名称：ET鸡表睾酮elisa Kit
英文名称：Chicken ET (Epitestosterone) ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：XG-E75974
试剂盒组成及试剂配制 ：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
试剂准备：
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。
公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：
1原装进口抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全：生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
Mint3抗体
β淀粉样前体蛋白结合蛋白3抗体
ASTN2抗体
星形肌动蛋白抗体
TREX1抗体
系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体
phospho-ATRIP 抗体
磷酸化系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体
Phospho-ATRIP 抗体
磷酸化系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体
AP2M1抗体
接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体
Phospho-AP2M1 抗体
磷酸化接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体
Annexin A7抗体
膜粘连蛋白7抗体
C3orf15抗体
3号染色体开放阅读框15抗体
APOB48R抗体
载脂蛋白B受体抗体
ABCA2抗体
三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2抗体
ApoB 抗体
载脂蛋白B抗体
ET鸡表睾酮elisa KitALOX15B抗体
花生四烯酸15脂氧合酶2抗体
APOC4抗体
载脂蛋白C4抗体
ARH抗体
低密度脂蛋白受体衔接蛋白抗体
AUP1抗体
原始广泛存在蛋白1抗体
ANKRD37抗体
锚蛋白重复结构域蛋白37抗体
A4GALT抗体
α1,4-半乳糖基转移酶1
AGTRAP抗体
血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白抗体
AX2R抗体
膜粘连蛋白2受体抗体
ACEI抗体
血管紧张素1转换酶抑制剂抗体
AATF抗体
拮抗凋亡转录因子抗体
AACT-Alpha1抗体
α-1抗胰糜蛋白酶抗体
alpha 1 Antitrypsin抗体
α-1抗胰蛋白酶抗体
ABCB6抗体
ATP结合蛋白家族6抗体
ABCG1抗体
三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗体
Adiponectin receptor 2抗体
脂联素受体2抗体
ANGEL1抗体
ANGEL1蛋白抗体
ANGEL2抗体
ANGEL2蛋白抗体
ANKLE2抗体
ANKLE2蛋白抗体
ANKMY1抗体
睾丸特异性锚样蛋白1抗体
ANKRD13B抗体
锚蛋白重复结构域蛋白13B抗体
ANKRD20A1抗体
锚蛋白重复结构域蛋白20A1抗体
操作流程：
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
2酶标板置4℃，包被*。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
6洗板，同4。
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
9洗板，同4。
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
