NF鸡神经丝蛋白定量试剂盒

实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素，经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值，计算样品浓度。
产品名称：NF鸡神经丝蛋白定量试剂盒
英文名称：Chicken NF (Neurofilament) ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：XG-E75517

试剂盒组成及试剂配制 ：

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

试剂准备：

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：

1原装进口抗体——、灵敏、特异

2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高

3的优化方案——回收利用率高、可靠性强

4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。

phospho-EGFR (Tyr1172) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
phospho-EGFR (Thr678) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
phospho-EGFR (Ser768) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
phospho-EGFR (Tyr1016) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
phospho-EGFR (Ser1142) 磷酸化表皮生长因子受体抗体
phospho-Ep300 (Ser1834) 磷酸化转录接头蛋白EP300抗体
Phospho-ELk1 (Ser389) 磷酸化细胞转录因子ELK1抗体
Phospho-ELk1(Thr417) 磷酸化细胞转录因子ELK1抗体
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305) 磷酸化雌激素受体α抗体
phospho-EIF4B (Ser422) 磷酸化真核翻译起始因子4B抗体
EIF4B 真核翻译起始因子4B抗体
phospho-Ep300 (Ser89) 磷酸化转录接头蛋白EP300抗体
phospho-ECT2 (Thr373) 磷酸化上皮细胞癌转化蛋白2抗体
phospho-EIF4G1 (Ser1238) 磷酸化真核翻译起始因子4G抗体
EGFR5 表皮生长因子受体5抗体
ETFB 电子转移黄素蛋白β肽/黄素蛋白抗体
Alpha-ENaC 钠通道蛋白α ENaC
E2F8 转录因子E2F8抗体
EMAP2 内皮单核细胞激活肽2抗体
Ecm2 细胞外基质蛋白2抗体
EMP3 上皮细胞膜蛋白3抗体
EVC2 膜蛋白EVC2抗体
EPDR1 哺乳动物室管膜相关蛋白1抗体
ESAM 内皮细胞粘附分子抗体
Epigen 上皮细胞有丝分裂蛋白抗体
Emerin Emerin蛋白抗体
ERK5 细胞外信号调节激酶5抗体
ENPP5 磷酸酶/磷酸二酯酶家族成员5抗体
EGR2 早期生长反应蛋白2抗体
phospho-Estrogen Receptor beta (ser105) 磷酸化雌激素受体β抗体
CHKL 乙醇胺激酶β抗体
EB2 微管相关末端结合蛋白2抗体
EME1 减数分裂内切酶EME1抗体
FAM62B 延伸突触蛋白2抗体
ESYT1 延伸突触蛋白1抗体
protein 4.2 红细胞膜蛋白4.2抗体
ELYS 转录因子ELYS蛋白抗体
Endomucin 内皮粘蛋白EMCN抗体
Epac1 环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1抗体
NF鸡神经丝蛋白定量试剂盒phospho-E2F1 (Thr433) 磷酸化转录因子E2F1抗体
ESE1 上皮细胞特异性转录因子1抗体

操作流程：1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
2酶标板置4℃，包被*。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
6洗板，同4。 
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
9洗板，同4。 
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。