PKC豚鼠蛋白激酶C进口ELISA试剂盒

发布时间:2021-11-10

实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素,经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值,计算样品浓度。
产品名称:PKC豚鼠蛋白激酶C进口ELISA试剂盒
英文名称:Guinea pig PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:XG-E73889

试剂盒组成及试剂配制 :

1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。

2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

试剂准备:

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。

α1-AGP人α1酸性糖蛋白elisa Kit

公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:

1原装进口抗体——、灵敏、特异

2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高

3的优化方案——回收利用率高、可靠性强

4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。

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操作流程:

1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 

2酶标板置4℃,包被*。
3洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
6洗板,同4。 
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
9洗板,同4。 
10每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,终测得的od值为两者之差w1-w2,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理:在得出标本s和阴性对照n的 od值后,计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。



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