NOX 4大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4ELISA试剂盒

实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素，经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值，计算样品浓度。
产品名称：NOX 4大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4ELISA试剂盒
英文名称：Rat NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：XG-E67230

试剂盒组成及试剂配制 ：

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

试剂准备：

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：

1原装进口抗体——、灵敏、特异

2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高

3的优化方案——回收利用率高、可靠性强

4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。

CH6N4 · 1/2H2SO4=123.12 CH6N4 · 1/2H2SO4=123.12
级别：AR 级别：AR
含量：≥99.0%  含量：≥99.0% 
熔点：≥200℃ 熔点：≥200℃
醇溶性试验：合格 醇溶性试验：合格
硫酸盐灰分：≤0.5% 硫酸盐灰分：≤0.5%
PH（15%，solution）：4～6 PH（15%，solution）：4～6
性状：粉末。易溶于水。熔点161℃。熔点206℃(无水)、207～208℃(半硫酸盐、一水合物)。中等毒,半数致死量(大鼠,经口)500mG/kG 性状：粉末。易溶于水。熔点161℃。熔点206℃(无水)、207～208℃(半硫酸盐、一水合物)。中等毒,半数致死量(大鼠,经口)500mG/kG
用途：生化研究。有机合成 用途：生化研究。有机合成
保存：RT 保存：RT
中文名称： 二苯胍 中文名称： 二苯胍
其他中文名称： 橡胶促进剂D；促进剂DPG；1,3-二苯胍；对称二苯胍；N,N-二苯胍；二聚丙二醇；N,N’-二苯基胍 其他中文名称： 橡胶促进剂D；促进剂DPG；1,3-二苯胍；对称二苯胍；N,N-二苯胍；二聚丙二醇；N,N’-二苯基胍
英文名称： DPG 英文名称： DPG
其他英文名称： Diphenyl guanidine；1,3-Diphenylguanidine；N,N'-Diphenylguanidine；sym-Diphenylguanidine；Melaniline 其他英文名称： Diphenyl guanidine；1,3-Diphenylguanidine；N,N'-Diphenylguanidine；sym-Diphenylguanidine；Melaniline
产品规格： AR，99% 产品规格： AR，99%
包装：100克 包装：100克
CAS号：102-06-7 CAS号：102-06-7
C13H13N3=211.26 C13H13N3=211.26
级别：AR 级别：AR
含量：≥99.0%  含量：≥99.0% 
熔点：148～151℃（2℃） 熔点：148～151℃（2℃）
乙醇溶解试验：合格 乙醇溶解试验：合格
干燥失重：≤0.3% 干燥失重：≤0.3%
硫酸盐：≤0.03% 硫酸盐：≤0.03%
NOX 4大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4ELISA试剂盒氯化物：≤0.003% 氯化物：≤0.003%
铁：≤0.001% 铁：≤0.001%
重金属：≤0.002% 重金属：≤0.002%
 

操作流程：

1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 

2酶标板置4℃，包被*。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
6洗板，同4。 
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
9洗板，同4。 
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。