免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司*供应的抗体,Anti-C8orf74抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质*,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
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产品名称 |
中文名称 |
货号 |
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Anti-C8orf74抗体 |
8号染色体开放阅读框74抗体 |
BJ-K013776 |
英文名称 Anti-C8orf74
中文名称 8号染色体开放阅读框74抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 34kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C8orf74
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 C8orf74; CH074_HUMAN; Uncharacterized protein C8orf74.
抗体的定义:
抗体(antibody),(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个特征,该外来目标被称为抗原。
动物抗体功能分类:
①猪抗体:猪瘟抗体,猪蓝耳抗体,猪圆环病毒抗体,猪伪狂犬抗体,猪细小病毒抗体,猪口蹄疫抗体,猪流感抗体等。
②禽抗体:小鹅瘟抗体,鸭肝抗体抗体,鸭浆膜炎抗体,禽流感抗体,新城疫抗体等
③牛抗体:牛口蹄疫抗体,奶牛乳房炎抗体,牛流行热抗体,牛病毒性腹泻抗体,牛出血性败血症抗体等
④羊抗体:羊痘抗体,羊口蹄疫抗体,羊小反刍兽疫抗体,羊快疫抗体,羊肠毒血症抗体,羊猝疽抗体,羊黑疫抗体等。
⑤犬抗体:犬狂犬病抗体、犬瘟热抗体、犬副流感抗体、犬腺病毒抗体与犬细小病毒病抗体,狐貉水貂的伪狂犬抗体、细小病毒抗体、乙脑抗体等。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
2',3'二脱氧尿苷(ddU)2,4'Difluorobenzophenone,96%5G通用试剂
潮B2,4Difluorobenzophenone,98%5G通用试剂
5'O(4,4'二甲氧基三基)N2异丁酰基2'脱氧鸟苷(DMTibu dG)2,6Difluorobenzophenone,≥98.0%5G通用试剂
N4甲酰基5'O(4,4'二甲氧基三基)2'脱氧胞甘(DMT Bz dC)3,4Difluorobenzophenone,98%5G通用试剂
N6甲酰基5'O(4,4'二甲氧基三甲基)2'脱氧腺苷(DMTdABz)Ethyl 4,4,4trifluorocrotonate,98.0%1G通用试剂
rU亚酰单体3,3'Difluorobenzophenone,99%1G通用试剂
BzrA亚酰单体4,4'Difluorobenzophenone, 99%25G通用试剂
iburG亚酰单体Ethyl 3amino4,4,4trifluorocrotonate...5G通用试剂
PF299804(EGFR抑制剂)Ethyl 4hydroxyphenylacetate,≥98.0%10G通用试剂
AcrC亚酰单体NBoctrans4fluoroLproline methyl ...250MG通用试剂
河豚毒素(含柠檬盐缓冲液)Methyl (±)1benzyloxycarbonyl4Boc...250MG通用试剂
河豚毒素纯粉Ethyl nipecotate,96.0%25G通用试剂
ACDC亚酰单体Ethylene glycol monosali,97.0%1G通用试剂
2,2'脱水5甲基尿苷Ethyl benzothiazole2carboxylate,97.0%5G通用试剂
7DEAZA7碘2'脱氧鸟苷Progesterone, ≥99%5G通用试剂
现货供应 AntiNoradrenaline Transporter (NET) (extracellular) Noradrenaline Transporter (NET) (胞外)抗体(50 ul)
现货供应 AntiNoradrenaline Transporter (NET) (extracellular) Noradrenaline Transporter (NET) (胞外)抗体(0.2 ml)
现货供应 NONO ,NONO,NonPOU Domain Containing,Octamerbinding,NRB54,P54NRB,Nuclear RNAbinding protein,54kD,NMT54 NONO抗体
现货供应 NSUN5 Polyclonal NOL1/NOP2/太阳域家族,成员5
现货供应 AntiNogo Receptor Nogo 受体抗体(50 ul)
现货供应 AntiNogo Receptor Nogo 受体抗体(0.2 ml)
现货供应 Noggin Noggin抗体
现货供应 AntiNociceptin Receptor Nociceptin 受体抗体(50 ul)
现货供应 AntiNociceptin Receptor Nociceptin 受体抗体(25 ul)
现货供应 AntiNociceptin Receptor Nociceptin 受体抗体(0.2 ml)
Anti-C8orf74抗体SKA1 纺锤体和着丝粒相关蛋白1抗体 规格: 0.2mlUACA 葡萄膜自身抗原Uaca抗体 规格: 0.2ml
MAP3K8/TPL2 丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体 规格: 0.2mlPRMT5 组蛋白氨酸甲基转移酶5抗体 规格: 0.2ml
RASSF6 RAS家族关联结构域蛋白6抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠IgG 规格: 0.1ml
IRAK1 白介素-1受体相关激酶1抗体 规格: 0.1mlRAB38 G蛋白结合蛋白RAB38抗体 规格: 0.2ml
ASBT/SLC10A2 顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体 规格: 0.2mlSSB/La 干燥症SSB/La抗体 规格: 0.2ml
CLASP2 细胞连接相关蛋白2抗体 规格: 0.2mlMSH Alpha 促黑细胞激素α抗体 规格: 0.1ml
TrK A/NTRK1 酪氨酸激酶A抗体 规格: 0.1mlphospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58) 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗体 0.1ml
C10orf63/Enkurin 10号染色体开放阅读框63抗体 规格: 0.2mlPXR 孤儿核受体PAR1抗体 规格: 0.2ml
ROC1/RNF75 环指蛋白75抗体 规格: 0.2mlSTIM1 基质交分子1抗体 规格: 0.2ml
DEDD2 死亡效应结构域蛋白2抗体 规格: 0.2mlMidkine 中期因子/肝素结合生因子抗体 规格: 0.1ml