免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司*供应的抗体,Anti-C20ORF144抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质*,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
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产品名称 |
中文名称 |
货号 |
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Anti-C20ORF144抗体 |
20号染色体开放阅读框144抗体 |
BJ-K013934 |
英文名称 Anti-C20ORF144
中文名称 20号染色体开放阅读框144抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C20ORF144
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 C20orf144; Chromosome 20 open reading
抗体的定义:
抗体(antibody),(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个特征,该外来目标被称为抗原。
动物抗体功能分类:
①猪抗体:猪瘟抗体,猪蓝耳抗体,猪圆环病毒抗体,猪伪狂犬抗体,猪细小病毒抗体,猪口蹄疫抗体,猪流感抗体等。
②禽抗体:小鹅瘟抗体,鸭肝抗体抗体,鸭浆膜炎抗体,禽流感抗体,新城疫抗体等
③牛抗体:牛口蹄疫抗体,奶牛乳房炎抗体,牛流行热抗体,牛病毒性腹泻抗体,牛出血性败血症抗体等
④羊抗体:羊痘抗体,羊口蹄疫抗体,羊小反刍兽疫抗体,羊快疫抗体,羊肠毒血症抗体,羊猝疽抗体,羊黑疫抗体等。
⑤犬抗体:犬狂犬病抗体、犬瘟热抗体、犬副流感抗体、犬腺病毒抗体与犬细小病毒病抗体,狐貉水貂的伪狂犬抗体、细小病毒抗体、乙脑抗体等。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
βApo土Nonidet P 40 Substitute (NP 40)100ML通用试剂
αApo土Ninhydrin (≥99%, for amino acid detec...10G通用试剂
二水合土1Naphthyl acetate (≥98%)5G通用试剂
4差向土1Naphthaleneacetic acid (≥95%, NAA)25G通用试剂
6α羟基紫杉Mineral oil (meets USP testing specifi...100ML通用试剂
2'O(tertButyldimethylsilyl)紫杉Mineral oil (for mouse embryo cell cul...100ML通用试剂
3'对羟基紫杉Thimerosal (USP grade, 97101%)1G通用试剂
紫杉d5L()Malic acid (95*, for cell cu...25G通用试剂
7差向紫杉DLMalic acid (≥98%)25G通用试剂
紫杉CMaleic acid disodium salt hydrate (≥9...10G通用试剂
2'O(tertButyldimethylsilyl)6α羟基7差向紫衫Maleic acid (ReagentPlus, ≥99%)100G通用试剂
NDebenzoyl7{[(2,2,2,trichloroethyl)oxy]carbonyl}紫杉NLauroylsarcosine sodium salt (≥94%)25G通用试剂
6α,3'对二羟基紫杉NLauroylsarcosine sodium salt (BioXtr...25G通用试剂
7差向 10去乙酰基紫衫3Isobutyl1methylxanthine (≥99%, IB...100MG通用试剂
(S,S)帕洛诺司琼盐盐d4Iodoacetic acid (≥99%, powder or flak...25G通用试剂
现货供应 FCRLB Polyclonal Fc受体样蛋白B
现货供应 FCRL4 Polyclonal Fc受体样蛋白4
现货供应 FCRL2 Polyclonal Fc受体样蛋白2
现货供应 FCRL1 Polyclonal Fc受体样蛋白1
现货供应 Fbx32/MAFbx/ATR1 (Fbox only protein 32, Atrogin1, Muscle atrophy Fbox protein) Fbx32/MAFbx/ATR1抗体
现货供应 FATP4 (Solute carrier family 27 (Fatty acid transporter) member 4) FATP4抗体
现货供应 FASL Polyclonal Fas配体/TNF家族成员6
现货供应 FAKD5 Polyclonal Fas活激酶结构域蛋白5
现货供应 FAIM1 Polyclonal Fas凋亡抑制分子1
现货供应 FAST Polyclonal FAST
Anti-C20ORF144抗体HSP71 热休克蛋白71抗体 规格: 0.1ml
DDC/DOPA Decarboxylase 多巴胺脱羧酶抗体 规格: 0.1ml
Adropin 能量平衡相关蛋白抗体 规格: 0.2ml
Secretin 分泌素抗体 规格: 0.1ml
ASB17 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族17抗体 规格: 0.2ml
PSA(Pa3) 人前列特异性抗原单克隆抗体(包被) 规格: 0.1ml
Phospho-LRP6 (Ser1490) 磷酸化脂蛋白受体相关蛋白6抗体 规格: 0.1ml
R-cadherin/Cadherin 4 R-钙粘附分子抗体 规格: 0.1ml
GRPP 胰高糖素相关肽抗体 规格: 0.2ml
SASH1 瘤抑制基因PEPE1抗体 规格: 0.2ml