CCNB 兔细胞周期素Belisa Kit

实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素，经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值，计算样品浓度。
产品名称：CCNB 兔细胞周期素Belisa Kit
英文名称：Rabbit CCNB (Cyclin-B) ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：XG-E73100

试剂盒组成及试剂配制 ：

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

试剂准备：

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：

1原装进口抗体——、灵敏、特异

2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高

3的优化方案——回收利用率高、可靠性强

4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。

HNP1-3(Human neutrophil peptide 1-3) ELISA Kit  人中性粒细胞防御素1-3 96T
ECP(Human eosinophil cationic protein) ELISA Kit  人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 96T
PS(Human plasma anticoagulant protein S) ELISA Kit  人血浆抗凝蛋白S 96T
PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit  人血浆抗凝蛋白C 96T
Fc Gamma(Human Fc region of immunoglobulin G) ELISA Kit  人免疫球蛋白G Fc片段 96T
CyPB(Human cyclophilin B) ELISA Kit  人嗜环蛋白/亲环素B 96T
C4BP(Human C4 binding protein) ELISA Kit  人C4结合蛋白 96T
C3c(Human Complement fragment 3c) ELISA Kit  人补体片段3c 96T
C7(Human Complement fragment 3c0 ELISA Kit  人补体7 96T
A Beta1-42(Human amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit  人β淀粉样蛋白1-42 96T
Human chemerin ELISA Kit   人chemerin 96T
F XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit  人凝血因子Ⅻ 96T
F X III (Human coagulation factor X III ) ELISA Kit  人凝血因子ⅩⅢ 96T
F III (Human coagulation factor III 0 ELISA Kit  人凝血因子Ⅲ 96T
C1q(Human Complement 1q) ELISA Kit  人补体1q 96T
CCNB 兔细胞周期素Belisa KitGP- IV (Human platelet membrane glycoprotein IV ) ELISA Kit  人血小板膜糖蛋白Ⅳ 96T
Human Thymosin Alpha1 ELISA Kit  人胸腺肽α1 96T
CCP(Human complement control protein) ELISA Kit  人补体调节蛋白 96T
PBP/CXCL7(Human platelet basic protein) ELISA Kit  人血小板碱性蛋白 96T
HLA-C(Human leukocyte antigen C) ELISA Kit  人类白细胞抗原C 96T
HLA-E(Human leukocyte antigen E) ELISA Kit  人类白细胞抗原E 96T

操作流程：

1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 

2酶标板置4℃，包被*。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
6洗板，同4。 
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
9洗板，同4。 
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。