ERK 兔细胞外信号调节激酶检测试剂盒

实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素，经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值，计算样品浓度。
产品名称：ERK 兔细胞外信号调节激酶检测试剂盒
英文名称：Rabbit ERK (Extracellular Signal Regulated Kinase) ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：XG-E73047

试剂盒组成及试剂配制 ：

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

试剂准备：

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：

1原装进口抗体——、灵敏、特异

2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高

3的优化方案——回收利用率高、可靠性强

4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。

CGRP ELISA Kit  大鼠降钙素基因相关肽 96T
PTHrP(Mouse Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit  小鼠甲状旁腺激素相关蛋白 96T
Col I (Human Collagen Type I ) ELISA Kit  人Ⅰ型胶原 96T
P I CP(Human procollagen III N-terminal peptide) ELISA Kit  人Ⅰ型前胶原羧基端肽 96T
LPA(Mouse L-phenylalanine) ELISA Kit  小鼠苯丙氨酸 96T
MTL ELISA Kit  大鼠胃动素 96T
Beta-EP ELISA Kit  大鼠β内啡肽 96T
HA(Human Hyaluronic acid) ELISA Kit  人透明质酸 96T
ACA-IgA(Mouse anti-cardiolipin antibody IgA) ELISA Kit  小鼠抗心磷脂抗体IgA 96T
ACA-IgM(Mouse anti-cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit  小鼠抗心磷脂抗体IgM 96T
Col IV (Human Collagen Type IV ) ELISA KIT  人Ⅳ型胶原 96T
SS ELISA Kit  大鼠生长抑素 96T
Fbg ELISA Kit  大鼠血纤蛋白原 96T
Col III (Human Collagen Type III ) ELISA KIT  人Ⅲ型胶原 96T
ACA-IgG(Mouse anti-cardiolipin antibody IgG) ELISA Kit  小鼠抗心磷脂抗体IgG 96T
AP12(Mouse apelin 12) ELISA Kit  小鼠apelin 12 96T
LN(Human Laminin) ELISA KIT  人层连蛋白/板层素 96T
sm Actinin- Alpha ELISA Kit  大鼠横纹肌辅肌动蛋白α 96T
FN(Human Fibronectin) ELISA Kit  人纤连蛋白 96T
IFN- Alpha(Mouse Interferon Alpha) ELISA Kit  小鼠α干扰素 96T
MYS ELISA Kit  大鼠肌球蛋白 96T
ERK 兔细胞外信号调节激酶检测试剂盒Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit  小鼠的牛血清白蛋白残留检测 96T

操作流程：

1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 

2酶标板置4℃，包被*。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
6洗板，同4。 
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
9洗板，同4。 
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。