免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司*供应的抗体,Anti-phospho-ASK1(Ser966)抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质*,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
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产品名称 |
中文名称 |
货号 |
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Anti-phospho-ASK1(Ser966)抗体 |
磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 |
BJ-K015262 |
英文名称 Anti-phospho-ASK1(Ser966)
中文名称 磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 152kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ASK1 around the phosphorylation site of Ser966
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 ASK1 (phospho S966); p-ASK1 (phospho S966); ASK1(Phospho-Ser966); Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 5; MAPK/ERK kinase kinase 5; MEK kinase 5; Short=MEKK 5; Apoptosis signal-regulating kinase 1; ASK-1; MAP3K5; ASK1; MAPKKK5; MEKK5.
抗体的定义:
抗体(antibody),(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个特征,该外来目标被称为抗原。
动物抗体功能分类:
①猪抗体:猪瘟抗体,猪蓝耳抗体,猪圆环病毒抗体,猪伪狂犬抗体,猪细小病毒抗体,猪口蹄疫抗体,猪流感抗体等。
②禽抗体:小鹅瘟抗体,鸭肝抗体抗体,鸭浆膜炎抗体,禽流感抗体,新城疫抗体等
③牛抗体:牛口蹄疫抗体,奶牛乳房炎抗体,牛流行热抗体,牛病毒性腹泻抗体,牛出血性败血症抗体等
④羊抗体:羊痘抗体,羊口蹄疫抗体,羊小反刍兽疫抗体,羊快疫抗体,羊肠毒血症抗体,羊猝疽抗体,羊黑疫抗体等。
⑤犬抗体:犬狂犬病抗体、犬瘟热抗体、犬副流感抗体、犬腺病毒抗体与犬细小病毒病抗体,狐貉水貂的伪狂犬抗体、细小病毒抗体、乙脑抗体等。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
4,4'二硝基二(>99.0%(GC)) 质量规格:美国进口 2'Deoxyguanosine13C,15N2
4,4'二戊氧基偶(>95.0%(N)) 质量规格:美国进口 O6[4(Aminomethyl)benzyl]guanine
4,4'二羧基二(>98.0%(GC)(T)) 质量规格:美国进口 AraG hydrate
4,4'二壬氧基偶 质量规格:美国进口 2'Deoxyguanosine monohydrate
4,4'二羟基二(>98.0%(GC)) 质量规格:美国进口 N2Phenoxyacetyl Guanine
4,4'二羟基二(>98.0%(GC)(T)) 质量规格:美国进口 6OMethyld3guanine
4,4二羟基二砜(>98%,BR) 质量规格:美国进口 N7(2Carbamoyl2hydroxyethyl)guanine
4,4'二二(>99.0%(GC)) 质量规格:美国进口 2Amino6,8dihydroxypurine Hydrochloride
4,4'二二砜(>98.0%(GC)) 质量规格:美国进口 alltrans Retinoic Acid Methyl Ester
4,4'二氧基二(>99.0%(GC)) 质量规格:美国进口 13cis Retinoic Acid Methyl Ester
Tannase鞣酶1公斤高纯,
Tannic acid鞣50毫升CP,
Tantalum(V) oxide钽酐1克CP,
Tantalum钽100毫克AR,99.8%
Tantalum钽粉500毫克基准试剂,99.95%
TAPS sodium salt3[N[三(羟基)基]基]磺25克AR,
TAPSO sodium salt3三羟基2羟基磺5克AR
TAPSO3[ (N三(羟基)基]2羟基磺100克IND,50%
TAPS三羟基基磺5克AR,95%
Taq plus DNA PolymeraseTaq plus DNA聚合酶25毫升BR,500800u/mg,酵母,液体
Taurine2基磺25克BR,99%
TBABN,N,N三基1铵化物5克基准试剂,99.5%
TBACN,N,N三基1铵化物25克AR,
TBAF trihydrate四正基三水合物10克AR,90%
TBAF四正基5克3N,0.1×100㎜
3(2,2二基)2,2二基环羧 alpha基3氧基苄酯备注:
菊酯
Cypermethrin 促销 分子式:C22H19CL2NO3 分子量:416.30
3(2,2二基)2,2二基环羧 alpha基3氧基苄酯备注:
菊酯
Cypermethrin 促销 分子式:C22H19CL2NO3 分子量:416.30
3(2,2二基)2,2二基环羧 alpha基3氧基苄酯
氟菊酯 68359375
βCyfluthrin 促销 分子式:C22H18CL2FNO3 分子量:434.29
百树得,高效氟菊酯备注:A02
氟菊酯 68359375
Anti-phospho-ASK1(Ser966)抗体小鼠4羟基壬烯酸(4-HNE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装