免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司*供应的抗体,Anti-Phospho-ATG4C(Ser451)抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,品质*,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
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产品名称 |
中文名称 |
货号 |
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Anti-Phospho-ATG4C(Ser451)抗体 |
磷酸化自噬相关蛋白4C抗体 |
BJ-K015268 |
英文名称 Anti-Phospho-ATG4C(Ser451)
中文名称 磷酸化自噬相关蛋白4C抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 免疫学 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶 线粒体 泛素
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ATG4C around the phosphorylation site of Ser451
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 APG4 autophagy 4 homolog C (S. cerevisiae); APG4 autophagy 4 homolog C; APG4 C; APG4-C; APG4C; ATG 4C; ATG4 autophagy related 4 homolog C (S. cerevisiae); Atg4c; ATG4C_HUMAN; AUT (S. cerevisiae) like 1, cysteine endopeptidase; AUT like 1, cysteine endopeptidase (S. cerevisiae); AUT like 1, cysteine endopeptidase; AUT like 3 cysteine endopeptidase; AUT-like 3 cysteine endopeptidase; AUTL1; AUTL3; Autophagin 3; Autophagin-3; Autophagy related cysteine endopeptidase 3; Autophagy related protein 4 homolog C; Autophagy-related cysteine endopeptidase 3; Autophagy-related protein 4 homolog C; Cysteine protease ATG4C; EC 3.4.22; FLJ14867; OTTHUMP00000010715.
抗体的定义:
抗体(antibody),(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个特征,该外来目标被称为抗原。
动物抗体功能分类:
①猪抗体:猪瘟抗体,猪蓝耳抗体,猪圆环病毒抗体,猪伪狂犬抗体,猪细小病毒抗体,猪口蹄疫抗体,猪流感抗体等。
②禽抗体:小鹅瘟抗体,鸭肝抗体抗体,鸭浆膜炎抗体,禽流感抗体,新城疫抗体等
③牛抗体:牛口蹄疫抗体,奶牛乳房炎抗体,牛流行热抗体,牛病毒性腹泻抗体,牛出血性败血症抗体等
④羊抗体:羊痘抗体,羊口蹄疫抗体,羊小反刍兽疫抗体,羊快疫抗体,羊肠毒血症抗体,羊猝疽抗体,羊黑疫抗体等。
⑤犬抗体:犬狂犬病抗体、犬瘟热抗体、犬副流感抗体、犬腺病毒抗体与犬细小病毒病抗体,狐貉水貂的伪狂犬抗体、细小病毒抗体、乙脑抗体等。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
3甘油激酶 质量规格:美国进口 Moxifloxacin, Hydrochloride Monohydrate
3奎宁环盐盐 质量规格:美国进口 8Fluoro6methoxy Moxifloxacin
3奎宁(标准品) 质量规格:美国进口 (R)Naproxen AcylβDglucuronide Benzyl Ester
3氧基地雷他定 质量规格:美国进口 (S)Naproxen AcylβDglucuronide Benzyl Ester
3酰利福SV(标准品) 质量规格:美国进口 (R)ODesmethyl Naproxen
3基黄8羧(标准品) 质量规格:美国进口 (S)Naproxen AcylβDglucuronide
3基菲(>98.0%(GC)) 质量规格:美国进口 (S)Naproxen IsoacylβDglucuronide
3基d3腺嘌呤 质量规格:美国进口 (R)Naproxen AcylβDglucuronide
3基2并噻唑腙盐盐,水合 质量规格:美国进口 (1RS)1(6Methoxy2naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K)
3磺炳基十四基二甜菜碱 质量规格:美国进口 6'Methoxy2'acetonaphthone (Naproxen Impurity L)
TMAC化四基铵500克AR,99%
TMB•2HC1TMB盐盐100克BR,90%
TMBStop solution3,3,5,5四基联Stop10毫升BR,
TMBTMB游离5毫克BR,
TMBUS(ultra sensitive) solution3,3,5,5四基联US1公斤BR,
TMD10化四铵500毫升AR,99.8%
TMEDA四替二10克纯,99%
TMEDA延胡索0.25毫升高纯,99%
TMG四基胍1克AR
TMP酯25克试剂级,
TMP三基5克CP,
TMP胸苷二100毫克植物细胞培养级,99%
TMTDN,N’四基二双羰100克BR,
TOA三辛1克5N
Tobramycin妥布1克BR,3000u/mg
2氨基3氨基酰 L天门冬酰 L天冬素 L天冬素,一水 L天冬素
L天冬酰 70473
LAsparagine 促销 分子式:C4H8N2O3 分子量:132.12
2氨基3氨基酰 L天门冬酰 L天冬素 L天冬素,一水 L天冬素
L天冬酰 70473
LAsparagine 促销 分子式:C4H8N2O3 分子量:132.12
2氨基3氨基酰 L天门冬酰 L天冬素 L天冬素,一水 L天冬素
L精氨 74793
L(+)Arginine 促销 分子式:C6H14N4O2 分子量:174.2
2氨基5胍基 L蛋白氨基 胍基氨 精氨YB11 CH
L精氨 74793
Anti-Phospho-ATG4C(Ser451)抗体兔子组胺(HIS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子肿瘤坏死因子α(TNF-α) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子脂联素(ADP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装