金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性菌，能被革兰氏染液染成紫红色。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，平板上能形成，色黄、厚而光泽、圆形的菌落。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长，甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感，其可形成肠毒素，造成中毒。金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸能耐高温，可作检测此菌用。
检测培养基：
干粉培养基：20-30℃
成品培养基：2-8℃
附加试剂：2-8℃
琼脂
（1）原理
对金黄色葡萄球菌的选择性在于氯化锂的作用，等同于亚碲酸钾。当它们被微生物还原后，会显示为黑色。
蛋黄可以检测出是否有由金黄色葡萄球菌产生的脂肪酶，如果存在，在菌落的周围会有一个明显的透明圈，有时会有少许沉淀。
（2）金黄色葡萄球菌的检验
样品处理：无菌取25g或25mL食品样品，放入225mL灭菌生理盐水中均质，制成10-1稀释液。
增菌培养：将10-1稀释液接入7.5%NaCl肉汤或胰蛋白胨肉汤中，37°C培养24小时。
分离培养：将上述稀释液或培养液分别划线血平板和Baird-Parker平板，置37°C培养24-48小时。金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄或白色菌落，大而凸起，表面光滑，周围有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落为圆形，直径2-3mm，颜色灰或黑色，周围有一浑浊带。
染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5-1μm。
血浆凝固酶试验：吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置36±1°C培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。同时做阴阳性对照。
耐热核酸酶试验：将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，36±1°C培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。
（3）读数和说明
在Baird-Parker培养基上，金黄色葡萄球菌有两种存在形式：
——典型菌落：黑色，有光泽，突起，外围有清晰的透明圈，有时在外圈的环上有一不透明带。
——不典型菌落：有同样菌落形态，但周围无透明圈。这种不具有典型特征的情况多出现在日常污染中检测到的金黄色葡萄球菌。
经24小时孵育后，菌落直径为0.5-1mm；48小时孵育后，直径为1-2mm。
确认：
必须用至少5个典型菌落和5个不典型菌落进行确认试验，可以是凝固酶试验，或者是玻片凝集反应。
