产品名称:维生素B6测试盒50管/48样
检测方法:可见分光光度法
产品规格:50管/48样
产品货号:BH-9611383-2
产品分类:维生素系列
商品介绍:
测定意义
维生素B6(Vitamin B6)又称吡哆素,其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺,在体内以磷酸酯的形式存在,是一种水溶性维生素,在细胞中参与多种蛋白质和氨基酸的代谢,对生物体具有极其重要的作用。
测定原理
VB6与4-氨基安替比林在强氧化剂作用下生成稳定的黄色化合物,在390nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、可见分光光度计、恒温水浴锅、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约2小时,可测50例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
3、再现性好:变异系数CV=1.7%。
4、回收试验: X =97%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测动物血清(浆)、组织等。
通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
样品的准备:
细胞样品的准备:对于贴壁细胞,吸净细胞培养液,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液,适当吹打以充分裂解细胞;对于悬浮细胞,600g离心5分钟收集细胞,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入SOD样品制备液,适当吹打,以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl,含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品,按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
血浆或红细胞样品的准备:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟,移取上清至另一新的1mL离心管中,适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法,或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
上述样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10~20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20~100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。
根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清,通常需要稀释10~100倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
公司提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更的产品。
短小芽孢杆菌9号染色体开放阅读框91抗体Human FBXW4(F-box and WD repeat domain containing 4) 酶联免疫试剂盒兔子载脂蛋白B48(apo-B48)免疫试剂盒
Vagococcus sp.9号染色体开放阅读框93抗体Human FBXO18 酶联免疫试剂盒兔子孕激/孕(PROG)免疫试剂盒
杨树细盾霉9号染色体开放阅读框96抗体Human FBXW5 酶联免疫试剂盒兔子游离脂肪(FFA)免疫试剂盒
假单胞菌9号染色体开放阅读框98抗体Human FBXW7 酶联免疫试剂盒兔子硬骨(SOST)免疫试剂盒
竹荪属分裂周期蛋白5样蛋白抗体Human FBXO22 酶联免疫试剂盒兔子胰高血糖(GC)免疫试剂盒
球孢白僵菌钙粘蛋白23抗体Human FCHSD1 酶联免疫试剂盒兔子胰岛样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒
松生拟层孔菌色p450 2s1抗体Human FCRLB 酶联免疫试剂盒兔子胰岛样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒
香菇7角蛋白16抗体Human FBXO28 酶联免疫试剂盒兔子胰岛(INS)免疫试剂盒
简青霉半胱蛋白蛋白-6抗体Human FMNL1 酶联免疫试剂盒兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试剂盒
土生丛毛单胞菌c-fos抗体Human FMR1NB 酶联免疫试剂盒兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫试剂盒
暗产色链霉菌9号染色体开放阅读框23抗体Human FKBP6 酶联免疫试剂盒兔子血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)免疫试剂盒
扁菌9号染色体开放阅读框25抗体Human FKBP3 酶联免疫试剂盒兔子血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)免疫试剂盒
灵芝属9号染色体开放阅读框30抗体Human FKBP7 酶联免疫试剂盒兔子血小板活化因子(PAF)免疫试剂盒
里亚氏须腹菌9号染色体开放阅读框37抗体Human FKBP2 酶联免疫试剂盒兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒
Pedobacter9号染色体开放阅读框40抗体Human FKBP9 酶联免疫试剂盒兔子血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌9号染色体开放阅读框41抗体Human FBXO3 酶联免疫试剂盒兔子血管紧张1-7(Ang1-7)免疫试剂盒
绿产色链霉菌Streptomyces│viridochromogenes 质量规格:>98%,BRv-rel禽网状内皮过多症病癌基因同源物B试剂盒霹雳萝芙木碱
越南芽孢杆菌Bacillus│vietnamensis 质量规格:>98%,BRvav3鸟核苷交换因子试剂盒蒲公英赛
小单孢菌属Micromonospora│sp. 质量规格:>99%,BRU型肌激,线粒体试剂盒哌异黄
维生素B6测试盒50管/48样RV Ag(Human Rotavirus antigen) ELISA Kit 人轮状病毒抗原规格: 48T
LP Ag(Human Legionella pneumophila antigen) ELISA Kit 人军团jun抗原规格: 48T
Human colicin ELISA Kit 人大肠junsu规格: 48T
ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit 人腺病毒抗原规格: 48T
Human Trichinella antibody ELISA Kit 人旋毛虫规格: 48T