操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及*湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
公司细胞现货供应,质量有保证、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供*价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称 |
英文名称 |
规格 |
货号 |
甘油三脂(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-微板法) |
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96T |
BJ-01X12188 |
中文名称:甘油三脂(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-微板法)
英文名称:
产品规格:96T
发货周期:1~3天
注意事项:
介绍:又称GPO-酶法或酶,为国内外的方法,甘油三脂被分解成甘油,甘油被甘油激酶及ATP磷酸化,经GPO氧化成G3P,再经3P反应显色,酶标仪或全自动生化分析仪500-520nm比色检测吸光度。
储存条件:2~8℃,避光,6个月
用途:单试剂GPO-法检测血清、血浆、组织等样本的甘油三酯(又称三酰甘油)含量
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细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗体 规格: 0.1mlPhospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚磷酸盐磷酸样蛋白1抗体 规格: 0.1ml
Laminin Beta 2/Laminin S 层粘连蛋白β2抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.1ml
AGT 管紧张素原抗体 规格: 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的小鼠抗羊IgG 规格: 0.1ml
大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA KitELISA.96T/48T大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
CDK2 周期素依赖性激2抗体 规格: 0.1ml
MPP9/MPHOSPH9 有丝分裂细胞周期蛋白MPP9抗体 规格: 0.2ml
phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激3β抗体 规格: 0.1ml
Rabbit anti-Pig IgG whole serum 兔抗猪IgG抗清 规格: 1ml
Phospho-NFKB p65(Ser468) 磷酸化细胞核因子NF-κB p65抗体 规格: 0.1ml
甘油三脂(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-微板法)Encephalitozoon spp.脑胞内原虫属通用·染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Nucleophosmin 核仁磷酸蛋白抗体 0.2ml
腰果源性成分PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的小鼠抗兔IgG 规格: 0.1ml
Theileria spp.泰勒属原虫通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CDK4 周期素依赖性激4抗体 规格: 0.1mlphospho-FXYD1 (Ser83) 磷酸化磷酸神经膜抗体 规格: 0.1ml
Red Clover Mottle Virus(RCMV)红三叶草斑点病毒PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周UTS2D 尾加压素2相关肽抗体 规格: 0.2mlPhospho-SGK1 (Thr256) 磷酸化糖皮质激素调节激1抗体 规格: 0.1ml
Cortex cinnamomi肉桂PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周IL-33 白介素33抗体 规格: 0.1mlIL-15 白介素15抗体 规格: 0.1ml
Avian Reticuloendotheliosis Virus(REV)禽网状内皮组织增殖病病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-EGFR (Ser1070) 磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1mlCKAP4 细胞骨架相关蛋白4抗体 规格: 0.2ml
Pneumocystis carinii卡氏肺孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周human C3 补体C3抗体 规格: 0.1mlCD38 CD38抗体 规格: 0.1ml
Pericarpium citri reticulatae陈皮探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周IQCA1 IQCA1蛋白抗体 规格: 0.2mlGLUT3 葡萄糖转运蛋白3抗体 规格: 0.1ml
Grass carp reovirus(GCRV)草鱼呼肠孤病毒2型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相关基因NDRG1抗体 规格: 0.1mlZO-1 胞质紧密粘连蛋白1抗体(闭锁小带蛋白1) 规格: 0.1ml
Giardia intestinalis肠贾第虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周COBLL1 Cordon bleu蛋白样1抗体 规格: 0.2mlPhospho-MEK1/2(Ser218/222) 磷酸化丝裂原活化蛋白激激1/2抗体 规格: 0.1ml