注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
仅供科研实验、不得用于临床
产品名称 |
规格 |
货号 |
IEF阴极缓冲液 |
250ml |
FS-R7505 |
分类:蛋白电泳
储存条件:室温,12个月
用途:蛋白质组学电泳
注意事项:IEF Cathode buffer
标准溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
兔C反应蛋白(rabbit CRP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile 675126-26-8 中文名: 分子式:C15H19N3O5
兔C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 4-Aza-5androstan-1-ene- 3-one-17carboxylic acid 中文名: 分子式:C19H27NO3 度:98.0%
兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 4-Aza-5androstan-1-ene- 3-one-17carboxylic acid 中文名: 分子式:C19H27NO3
兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate 中文名: 分子式:C22H25N3O2 度:98.0%
兔8-异构前列腺素elisa试剂盒 兔8-异构前列腺素试剂盒 规格型号:96T/48T 兔8-异构前列腺素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔8-异构前列腺素试剂盒、兔8-异构前列腺素elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 4-Benzyloxyindole 中文名:4-苄氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0%
(R)-4-Methoxydalbergione 中文名:(R)-4-甲氧基黄檀醌 分子式:C16H14O3 度:98.0% 兔抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Jacaranone 中文名: 分子式:C9H10O4 度:98.0% 兔抑瘤素M(OSM)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Hydroxychimaphilin 中文名:3-羟基梅笠草素 分子式:C12H10O3 度:98.0% 兔生成素2(ANG-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chimaphilin 中文名:梅笠草素 分子式:C12H10O2 度:98.0% 兔紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Prerubialatin 中文名: 分子式:C27H20O7 度:% 中文名称 方法 规格
IEF阴极缓冲液RabbitD-Dimer,D2DELISAKit兔子D二聚体(D2D)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2,2'-Dithiobisbenzanilide 135-57-9 中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式:C26H20N2O2S2
RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit兔紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide 中文名:2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚 分子式:C12H10N2O2S
RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit兔生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Allylphenol 中文名:2-烯丙基酚 分子式:C9H10O
Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Acetonaphthone 中文名:2'-萘乙酮 分子式:C12H10O
RabbitAmylinELISAKit兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 22-Dehydroclerosteryl acetate 中文名: 分子式:C31H48O2
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,使用浓度为50-1000μg/mL。对于*次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定*筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) *天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养*;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,*将细胞稀释至丰度不过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。