人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)elisa试剂盒

人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)elisa试剂盒试剂准备:

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。

标本的采集与保存:

1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或4oC *,然后1000×g 离心20 分钟,取上清即

可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。

2、血浆:用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30 分钟内于2-8oC 1000×g 离心15 分钟,

取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。

3、组织匀浆:

1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);

2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2 次)。

3) 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟,留取上清即可检测。

4、其它生物标本:请1000×g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。

试剂和样本的控制方法:

一、试剂

1.试剂的选择:*明确要求要采用批批的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照*标准进行生产,已获得*承认的“三证”,每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。

2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。

二、样本

1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;

类风湿因子的控制方法:

①用F(ab)2替代完整的IgG;

②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;

③检测抗原时,可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解;

补体的控制方法:

①用EDTA稀释标本;

②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活;

2.外源性干扰因素:包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等;

控制方法:采血时规范操作,采集的血液勿用力震荡,以防溶血;收集标本时采用无菌试管,经检测后再低温冻存;保存时间不宜过久,检测时尽量采用新鲜标本;对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再离心分离血清。


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