细胞冻存的基本原理： 慢冻
手动降温：将细胞依序放在4℃（30分钟）、-20℃（1小时）、-80℃（*）后移至液氮中保存。
程序降温盒：是一般*广泛使用的降温法，为一种特制冷冻容器（填充异丙醇或依靠特制金属导热），使细胞以每分钟约-1℃的速度降至-80℃（*），然后移至液氮中保存。
大家可以根据自身情况或者实验条件选择不同的冻存方式。
细胞冻存是细胞保存的主要方法。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。
细胞代谢过程需要各种蛋白酶的参与，而这些蛋白酶在环境温度低于-70℃时会集体罢工，低温贮藏的目的是通过低温使代谢活动近乎停止。细胞因此进入休眠状态，使细胞“不会老”，可以长期保存。
因为冻融过程对所有细胞和组织都是有一定伤害的，因此，需要开发出有效的技术来防止细胞死亡和损伤。
这时，低温保护剂就发挥出它的作用了。
低温保护剂可保护细胞不受细胞内冰冻影响，目前多采用DMSO、甘油、*和丙二醇等渗透型低温保护剂。它们的作用机制包括：自由进入细胞，取代水，使冰点下降，充当盐的二次溶剂，提高细胞膜对水的通透性。
但是，部分低温保护剂在缓慢冷冻过程中虽然会保护细胞，但它们也会引起细胞毒性，尤其是在室温下。因此，在标准的自制冻存液中，会含有血清，血清是用来降低细胞毒性的，但血清也不是*的。
