逆转录反应体系分析
阅读：发布时间：2023-03-17
逆转录反应体系:
1. RNA模板
通常20μL的逆转录体系，加入RNA 1μg，如果RNA加入过多，会导致逆转录不充分。
2. 引物
常用的有随机引物和Oligo(dT)引物：
随机引物会将所有RNA分子均进行逆转录，此时得到的cDNA大部分来源于rRNA，主要在部分mRNA含有逆转录酶终止序列而难以得到其全序列时使用；
Oligo(dT)与真核生物mRNA的Poly(A)区域匹配，可以特异性的对mRNA进行逆转录。
3. 逆转录酶
逆转录过程涉及以RNA为模板合成DNA和以DNA为模板合成互补链的两个过程，目前市场上的逆转录酶都同时具有这些功能，因此只需在反应体系中加入逆转录酶即可，而不需额外加入DNA聚合酶。
4.4种dNTPs
