斑点酶联免疫分析仪校准方法

由生物计量技术委员会对口负责的《斑点酶联免疫分析仪》征求意见稿已经起草完成。现将征求意见稿发送给各位*及委员广泛征求意见。望在百忙之中进行评审并提出意见。请将意见寄(或发电子邮件)给生物计量技术委员会秘书处。

  节选该标准部分内容：
  本规范适用于支持 96 孔板的斑点酶联免疫分析仪的校准。
  斑点酶联免疫技术(Enzyme-ed immunospot, ELISPOT)结合了细胞培养 技术与酶联免疫吸附技术的优点，在单细胞水平检测分泌抗体的细胞或分泌细胞 因子的细胞分泌情况，统计斑点形成细胞的数目(即斑点计数)，从而评价机体 的细胞免疫或体液免疫功能。斑点计数是 ELISPOT 数据处理重要的一步，在 疫苗的临床评价中，斑点酶联免疫分析仪已经被强制性用于 ELISPOT 中。

 斑点酶联免疫分析仪(以下简称分析仪)是对 ELISPOT 板上各孔斑点图像 进行自动采集、分析计数的仪器，主要由成像系统、运动系统、控制处理系统和 显示系统组成。分析时，成像系统获取 ELISPOT 板上孔内斑点图像，然后通过 显示系统进行斑点统计，得到该孔内斑点数。
  校准用标准物质 模拟斑点标准物质：孔位与标准 96 孔板一致，结构如附录 A 所示，其中 A1 孔、A12 孔、H1 孔、H12 孔为定位孔;E3 孔、B6 孔、G6 孔、E9 孔内分别 为 50 个、100 个、200 个、500 个模拟斑点，相对扩展不确定度均优于 1.0%(k=2)。
  校准项目和校准方法
  示值误差 开启分析仪，按照使用说明书进行调试，将斑点模拟标准物质放入分析仪载 物仓并固定，采用 A1 孔、A12 孔、H1 孔、H12 孔进行定位后，分别对 E3、B6、 G6、E9 孔拍照并计数，每孔重复测量 3 次，按式(1)计算每孔内斑点个数的测 量值与标准值之间的相对示值误差。