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英文简称:NUGCS-3 细胞
产品名称:胃腺癌细胞
规格:T25
形态特性:上皮样
生长特性:贴壁生长
特征特性:
培养条件:RPMI1640+10%FBS
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
YES1 原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体
phospho-YES1 (Tyr426) 磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体
phospho-YES1(Tyr537) 磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体
Phospho-ZAP70 (Tyr315 + Tyr319) 磷酸化zeta相关蛋白70抗体
Phospho-ZAP70 (Tyr493) 磷酸化zeta相关蛋白70抗体
Phospho-Zyxin (Ser142+Ser143) 磷酸化斑联蛋白抗体
ZBTB41 锌指蛋白924抗体
ZIC3 内脏异位相关蛋白/锌指蛋白203抗体
zbtb11 锌指蛋白913抗体
ZBT24 锌指蛋白450抗体
ZA20D3 锌指蛋白20D3抗体
ZBED3 锌指蛋白BED3抗体
ZBTB38 锌指蛋白ZBTB38抗体
ZADH2 锌结合乙醇脱氢酶结构域蛋白2抗体
ZBTB3 锌指蛋白ZBTB3抗体
ZBBX 锌指蛋白ZBBX抗体
ZFP219 锌指蛋白219抗体
ZFP36L1 EGF应答因子1抗体抗体
phospho-ZFP36L1(Ser334) 磷酸化锌指蛋白36抗体
NUGCS-3 细胞ZNF347 锌指蛋白347抗体
ZBED5 锌指蛋白BED5抗体
ZNF704 锌指蛋白704抗体
ZNF434 宫颈癌抑癌蛋白5/锌指蛋白434抗体
ZCWCC1 ZCWCC1抗体
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
