Caov-3细胞

发布时间:2021-08-31

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英文简称:Caov-3细胞
产品名称:卵巢癌细胞
规格:T25
形态特性:上皮样
生长特性:贴壁生长
特征特性:该细胞1976年建系,源自一位54岁白人女性的卵巢腺癌组织。
培养条件:DMEM高糖)+10%FBS

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗体
PGRMC 孕激素受体膜相关元件抗体
Phospho-p63 (Ser395) 磷酸化P63肿瘤抑制基因抗体
Phospho-p63 (Ser455) 磷酸化P63肿瘤抑制基因抗体
POMT1 蛋白甘露糖基转移酶1抗体
Phospho-p40phox (Thr154) 磷酸化嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体
P70 Beta 2 核糖体S6蛋白激酶β2抗体
Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389) 磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体
Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr228) 磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体
Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr444 + Ser447) 磷酸化核糖体S6蛋白激酶β2抗体
phospho-P70 S6 Kinase beta 2 (Ser370) 磷酸化核糖体S6K2蛋白激酶抗体
phospho-P53(Ser15) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53(Ser20) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53(Ser37) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53(Ser46) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53(Ser6) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53 (Ser9) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53(Thr18) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
phospho-P53(Thr81) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
p73 alpha p53相关蛋白P73α抗体
p53 DINP1 p53诱导核蛋白1抗体
plant lectin B4 植物凝集素IB4
PIG3 p53诱导蛋白3抗体
PRMT4 组蛋白精氨酸甲基转移酶CARM1抗体
P2C 磷酸脂磷酸水解酶2抗体
p107 视网膜母细胞瘤样蛋白p107抗体
phospho-P53(Ser376) 磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体
PIGR 多聚免疫球蛋白受体抗体
PCDHB16 原钙粘蛋白16抗体
PRDM2 锌指蛋白RIZ1抗体
PRMT6 组蛋白精氨酸甲基转移酶6抗体
Caov-3细胞PRSS8 丝氨酸蛋白酶8抗体
phospho-PAK1/2/3(Thr423) 磷酸化p21激活激酶1/2/3抗体


细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

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