本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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猫种特异性基因检测试剂盒、荧光PCR法 |
50T |
详见说明书 |
BH-P64094 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
肝脂酶检测试剂盒硝酸锰溶液 CP，50 wt. % in H2O愈创木油 Anti-HMGA2/FITC 荧光素标记高迁移率族蛋白A2抗体IgG
过氧化物还原酶1检测试剂盒氯化锰,四水 AR,99.0%愈创木酚 >99.0%(GC)Anti-HMGB1/FITC 荧光素标记高迁移率族蛋白B1抗体IgG
球蛋白检测试剂盒氯化锰,四水 昆虫培养级，≥99%呋喃唑酮 98%Anti-HMGB4/FITC 荧光素标记高迁移率族蛋白B4抗体IgG
肌酸激酶同工酶BB检测试剂盒苯并咪唑 AR,98.5%呋喃西林 98%Anti-HNF-1 Alpha/FITC 荧光素标记肝核因子1α抗体IgG
前蛋白转化酶枯草溶菌素9检测试剂盒溴化亚铜 AR,99.0%二茂铁甲 98%Anti-HO-1/HSP32/FITC 荧光素标记血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗体IgG
载脂蛋白A1前体检测试剂盒溴化亚铜 CP,99.0%5-氟吲哚酮 98%Anti-HO-1/HSP32/FITC 荧光素标记血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗体IgG
组蛋白脱乙酰基酶检测试剂盒溴化亚铜 99.99%
DNA甲基转移酶检测试剂盒化亚铜 AR,99.5%潮霉素B 纯级Anti-HOXA10 /FITC 荧光素标记HOXA10抗体IgG
脂磷壁酸检测试剂盒咪唑-4，5-二羧酸 98%六羰基钨 99.9%
调节转录肽检测试剂盒2-巯基苯并咪唑 98%六羰基钨 97%Anti-PSGD/HOXB13/FITC 荧光素标记同源盒蛋白HOXB13抗体IgG
抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体检测试剂盒6-并咪唑 98%氢化 97%Anti-HOXc8/FITC 荧光素标记同源盒基因的一种抗体IgG
瓜氨酸化Ⅱ型胶原抗体检测试剂盒胡椒基丁 95%氢化钠 98%Anti-Hpt/HP /FITC 荧光素标记结合珠蛋白/触珠蛋白抗体IgG
胰多肽检测试剂盒胡椒基丁 分析标准品酸三甲酯 98%Anti-HPV/FITC 荧光素标记人类状瘤病抗体IgG
烟酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶检测试剂盒对叔丁基邻苯二酚 98%酸三甲酯 ≥99.5%(GC),蒸馏纯化Anti-HPV16-E6/E6 protein/FITC 荧光素标记人类状瘤病16抗体IgG
盐皮质激素受体检测试剂盒对叔丁基邻苯二酚 CP酸三乙酯 97%Anti-HPV16/18 protein/FITC 荧光素标记人类状瘤病16/18抗体IgG
猫种特异性基因检测试剂盒、荧光PCR法猪巨噬激蛋白(MSP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SNRPB ELISA Kit热休克蛋白71抗体
猪IV型胶原(COL4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SMO ELISA Kit微丝相关蛋白hHBrk1抗体
猪白介素20(IL-20)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SNX22 ELISA Kit植烷酰辅酶A羟化酶2抗体
猪酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SNAPC5 ELISA KitA型流感病H9N1神经氨酸酶型抗体
猪凝血因子Ⅹ(F10)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SMPDL3B(Sphingomyelin Phosphodiesterase Acid Like 3B) ELISA KitA型流感病H9N1血凝素型抗体
猪游离甲状腺素(fT4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SMPX ELISA Kit人类状瘤病33抗体
猪白三烯D4(LTD4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SNAPIN ELISA KitA型病H1N1蛋白抗体
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
