微生物无菌室介绍
微生物检测室亦即无菌室,一般是在微生物实验室内专辟一个小房间。无菌室外要设一个缓冲间,缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向,以免气流带进杂菌,目前主流的做法是把缓冲间设置成风淋室,既可以达到缓冲目的,又可以起到吹淋除尘的作用。无菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。
无菌室内的地面、墙壁必须平整,不易藏污纳垢,便于清洗。工作台的台面应该处于水平状态。无菌室和缓冲间都装有紫外线灯,无菌室的紫外线灯距离工作台面 1 米。工作人员进入无菌室应穿灭过菌的服装,戴帽子。
当前无菌室多存在于微生物工厂,一般实验室则使用净工作台(又名洁净工作台和净化工作台)。净工作台其主要功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃,通过洁净区域的百级净化环境保证实验的无污染性。通过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面,使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流动的气帘防止外部带菌空气进入。
净工作台的选择
净工作台有多种样式,那么在微生物无菌室中我们应该选择何种型号的净工作台呢?常规净台有水平和垂直之分,水平为对着人体吹风,如果是垂直的是从上往下吹风,桌在有排风孔,通过风机加压保持室内正压环境。因为无菌室环境使用时一般会有异味和刺激性气味,为避免对人体造成的不适和伤害,通常我们会选择"垂直型净工作台"如果是一些有毒有空气体的实验室,净台就无法满足生产的使用和需求,此种环境必须选择生物安全柜使其工作区域为负压。"净工作台和生物安全柜的区别".
微生物检测(无菌室)操作规程
◆无菌室应设有无菌操作间和缓冲间,无菌操作间洁净度应达到10000级,室内温度保持在20-24℃,湿度保持在45-60%。净台洁净度应达到100级。
无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。
◆严防一切灭菌器材和培养基污染,已污染者应停止使用。
◆无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液,等等。
◆无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求。
需要带入无菌室使用的仪器,器械,平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法灭菌。
◆工作人员进入无菌室前,必须用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在缓冲间更换工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手),方可进入无菌室进行操作。
◆无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时打开净台进行吹风。操作完毕,应及时清理无菌室,再用紫外灯辐照灭菌20分钟。
◆供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检查前,用70%的酒精棉球消毒外表面。
◆每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。
◆吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管。
◆接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物。
◆带有菌液的吸管,试管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒,24小时后取出冲洗。
◆如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或3%的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟,再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤。
◆凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水下冲洗,严禁污染下水道。
◆无菌室应每月检查菌落数。在净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml,放至凝固后,倒置于30~35℃培养箱培养48小时,证明无菌后,取平板3~5个,分别放置工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于30~35℃培养箱培养48小时,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得过1个菌落,10000级洁净室平均不得过3个菌落。如过限度,应对无菌室进行消毒,直至重复检查合乎要求为止。
垂直流净工作台特点:
1、 具有较高洁净度,静态百级。
2、 选用低噪音、振动小、高效离心式工作台风机。
3、 垂直流净工作台可单台使用也可组装成洁净生产线。
4、 垂直流净工作台装有方向轮装置,可根据生产需要随意移动。
5、 外箱体可选用冷轧钢板多层酸洗静电喷涂或全不锈钢,工作台面为不锈钢。
6、 如医用实验研究过程中有酸碱或腐蚀性气体,也可采用全不锈钢医用净化工作台。