产品名称：二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒25管/24样
检测方法：紫外分光光度法
产品规格：25管/24样
产品货号：BH-9611388-3
产品分类：光合作用系列
商品介绍：
测定意义：
核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubisco, EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶，既控制着CO2的固定，同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流，其活性的大小直接影响着光合速率。
测定原理：
(1)在Rubisco的催化下，1分子的核酮糖-1，5-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合，产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA)；(2)PGA可通过外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用，产生甘油醛-3-磷酸，伴随着NADH氧化生成NAD+；(3)在340 nm NADH有特征吸收峰，而NAD+没有此吸收峰，因此测定340nm吸光度下降速率可以代表Rubisco的羧化酶活性。
需自备的仪器和用品：
可见-紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
产品优点如下：
1、快速简便：全程约2小时，可测50例左右样本。
2、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
3、再现性好：变异系数CV=1.7%。
4、回收试验： X =97%。
5、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
6、测试面广：可测动物血清（浆）、组织等。
通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
实验结果判断我有妙招：
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：
① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。
样品的准备：
细胞样品的准备：对于贴壁细胞，吸净细胞培养液，用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍，按照每100万细胞加入100～200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液，适当吹打以充分裂解细胞；对于悬浮细胞，600g离心5分钟收集细胞，用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍，按照每100万细胞加入100～200μL的比例加入SOD样品制备液，适当吹打，以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3～5分钟，取上清作为待测样品。
组织样品的准备：动物用生理盐水(0.9% NaCl，含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品，按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3～5分钟，取上清作为待测样品。
血浆或红细胞样品的准备：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟，移取上清至另一新的1mL离心管中，适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法，或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
上述样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10～20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20～100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。
根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如，小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清，通常需要稀释10～100倍。准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-70℃冻存，但建议尽量当天完成测定。
公司提供的生化试剂盒，质量信得过产品，售后完善。服务于高校及免疫学科研单位，竭诚为您提供更周到的服务更的产品。
立枯丝核菌1号染色体开放阅读框67抗体Human EYA2 酶联免疫试剂盒兔子基质金属蛋白4(MMP-4)免疫试剂盒
大肠埃希菌1号染色体开放阅读框83抗体Human EYA4 酶联免疫试剂盒兔子基质金属蛋白3(MMP-3)免疫试剂盒
无色壳囊孢富含半胱分泌蛋白3抗体Human EZH1 酶联免疫试剂盒兔子基质金属蛋白13(MMP-13)免疫试剂盒
角磷灰鹅膏菌肿瘤/抗原26抗体Human FAM101A 酶联免疫试剂盒兔子肌钙蛋白C(TnC)免疫试剂盒
匍匐曲霉周期蛋白依赖性激抑制剂2C抗体Human FAM111B 酶联免疫试剂盒兔子黄体生成(LH)免疫试剂盒
纹黑蛋巢Cullin2抗体Human EYA1 酶联免疫试剂盒兔子环磷鸟苷(cGMP)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌钙调蛋白激CaMK1D抗体Human EYA3 酶联免疫试剂盒兔子核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)免疫试剂盒
长枝木霉CHX10蛋白抗体Human EYA2 酶联免疫试剂盒兔子核因子κB(NF-κB)免疫试剂盒
腹膜苍黄球菌畸胎瘤衍化生长因子单克抗体(C端)Human EXT2 酶联免疫试剂盒兔子胱天蛋白3(Casp-3)免疫试剂盒
球孢白僵菌周期蛋白依赖性激抑制剂2B抗体Human FAM105A 酶联免疫试剂盒兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫试剂盒
多杀性巴氏杆菌*畸胎瘤衍化生长因子单克抗体Human EXOC1 酶联免疫试剂盒兔子骨涎蛋白(BSP)免疫试剂盒
鲍氏不动杆菌泛连接蛋白CHFR抗体Human FAM105A 酶联免疫试剂盒兔子骨胶原交联/Ⅰ型胶原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)免疫试剂盒
酿酒酵母Cullin1抗体Human EXOC5 酶联免疫试剂盒兔子骨胶原交联(Cr)免疫试剂盒
类干酪乳杆菌肌动蛋白结合蛋白CFL抗体Human EXOC6 酶联免疫试剂盒兔子骨碱性磷(BALP)免疫试剂盒
斑玉蕈软骨衍生形态发生蛋白1抗体Human EXOC6B 酶联免疫试剂盒兔子还原(GR)免疫试剂盒
泡盛曲霉β-酪蛋白抗体Human EXOG 酶联免疫试剂盒兔子过氧化(GSH-Px)免疫试剂盒
传染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 质量规格：>98%,BRToll样受体3试剂盒牛磺熊去氧胆
结核分枝杆菌Mycobacterium│tuberculosis 质量规格：BRToll样受体2试剂盒牛磺
土壤黄色单胞菌Luteimonas│terricola 质量规格：BRToll样受体1试剂盒
二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒25管/24样MV IgM(Human measlesvirus IgM) ELISA kit 人麻疹病毒IgM规格： 48T
Cox V-IgM(Human Coxsackie virus IgM) ELISA Kit 人柯萨奇病毒IgM规格： 48T
Cox V-IgG(Human Coxsackie virus IgG) ELISA Kit 人柯萨奇病毒IgG规格： 48T
TB-Ab IgG(Human tuberculosis antibody IgG) ELISA Kit 人结核jun杆IgG规格： 48T
CP(Human cicatricial Pemphigoid) ELISA Kit 人瘢痕性天疱疮规格： 48T
