产品名称:果胶甲酯化程度测试盒50管/48样
检测方法:可见分光光度法
产品规格:50管/48样
产品货号:BH-9611399-2
产品分类:光合作用系列
商品介绍:
测定意义
植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分,除了起结构支撑、物质运输等作用外,还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。
测定原理
果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇,甲醇与2,4-戊二酮反应显色,在412nm下测定吸光值;同时半乳糖醛酸在70℃下与浓硫酸反应生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸与3,5-二甲基苯酚反应产生有色物质,在450nm下有*吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约2小时,可测50例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
3、再现性好:变异系数CV=1.7%。
4、回收试验: X =97%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测动物血清(浆)、组织等。
通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
样品的准备:
细胞样品的准备:对于贴壁细胞,吸净细胞培养液,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液,适当吹打以充分裂解细胞;对于悬浮细胞,600g离心5分钟收集细胞,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入SOD样品制备液,适当吹打,以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl,含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品,按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
血浆或红细胞样品的准备:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟,移取上清至另一新的1mL离心管中,适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法,或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
上述样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10~20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20~100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。
根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清,通常需要稀释10~100倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
公司提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更的产品。
枯草芽孢杆菌色P450Ⅱj3抗体Human DTX3L(E3 ubiquitin-protein ligase DTX3L) 酶联免疫试剂盒兔多肽YY(PYY)免疫试剂盒
类干酪乳杆菌钙激活离子通道4抗体Human E2F4 酶联免疫试剂盒兔对氧磷-1(PON1)免疫试剂盒
毛栓孔菌周期依赖性激6抗体Human EDAR 酶联免疫试剂盒兔乙酰转移(CHAT)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌周期依赖性激7抗体Human EDC3 酶联免疫试剂盒兔氧化物歧化1,可溶(SOD1)免疫试剂盒
黑曲霉3.3928周期依赖性激8抗体Human EDC4 酶联免疫试剂盒兔氧化物歧化[Mn],线粒体(SOD2)免疫试剂盒
米根霉周期蛋白依赖激抑制因子1C抗体Human E2F7 酶联免疫试剂盒兔敏C反应蛋白(hs-CRP)免疫试剂盒
马杜放线菌Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙抗体Human E2F8 酶联免疫试剂盒兔叉头框蛋白P3(FOXP3)免疫试剂盒
状共头霉c-fos抗体Human DNAJC2/MPP11 酶联免疫试剂盒兔补体片断5a(C5a)免疫试剂盒
酿酒酵母嗜铬粒A抗体Human DAPK1 酶联免疫试剂盒兔补体蛋白3(C3)免疫试剂盒
多根硬皮马勃CGRP降钙基因相关肽抗体Human DOCK180 酶联免疫试剂盒兔二(MDA)免疫试剂盒
酿酒酵母ChAT乙酰转移抗体Human DPPA4 酶联免疫试剂盒兔半胱蛋白抑制剂/胱抑C(Cys-C)免疫试剂盒
大叶胡枝子腐朽病周期蛋白N端结构域蛋白2抗体Human DCBLD2 酶联免疫试剂盒兔白介7(IL7)免疫试剂盒
铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)肌动蛋白结合蛋白CORO1A抗体Human DCC(Netrin receptor DCC) 酶联免疫试剂盒兔白介-5(IL-5)免疫试剂盒
大豆慢生根瘤菌抗菌肽/天蚕抗体Human DcR2 酶联免疫试剂盒兔白介17(IL-17)免疫试剂盒
猪瘟病间接ELISA抗体钙/钙调蛋白依赖蛋白激IG抗体Human CTRP4 酶联免疫试剂盒兔白介12(IL-12/P70)免疫试剂盒
多粘类芽胞杆菌表面趋化因子受体8抗体Human CST1 酶联免疫试剂盒兔白蛋白(Albumin)免疫试剂盒
谷棒杆菌Corynebacterium│glutamicum 质量规格:>99%,BRRNA结合蛋白FUS试剂盒萝卜硫苷
灰平链霉菌Streptomyces│griseoplanus 质量规格:>98%,BRRho家族GTP1试剂盒藜芦
CFCC1087资源名称: 苏云金芽胞杆菌东北亚种 质量规格:>98%,BRRho关联含卷曲螺旋蛋白激2试剂盒硫秋仙苷
果胶甲酯化程度测试盒50管/48样GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮质激su受体α规格: 48T
u-T3(Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA Kit 人高敏三碘jia状腺原氨suan规格: 48T
LHRH(Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 人黄体生成su释放激su规格: 48T
8-iso-PG(Human 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 人8异前列腺su规格: 48T
Human Renin ELISA Kit 人肾su规格: 48T