产品名称:多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒50管/24样
检测方法:可见分光光度法
产品规格:50管/24样
产品货号:BH-9611403-2
产品分类:光合作用系列
商品介绍:
测定意义:
多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一种细胞壁结合蛋白,可以催化果胶分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,参与果胶的降解,使细胞壁结构解体,导致果实软化,与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御,细胞伸展发育以及木质化有关,在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域具有较高的研究价值。
测定原理:
多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸,具有还原性醛基,与DNS试剂反应生成红棕色物质,在540nm有特征吸收峰,测定540nm处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约2小时,可测50例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
3、再现性好:变异系数CV=1.7%。
4、回收试验: X =97%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测动物血清(浆)、组织等。
通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
样品的准备:
细胞样品的准备:对于贴壁细胞,吸净细胞培养液,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液,适当吹打以充分裂解细胞;对于悬浮细胞,600g离心5分钟收集细胞,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入SOD样品制备液,适当吹打,以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl,含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品,按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
血浆或红细胞样品的准备:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟,移取上清至另一新的1mL离心管中,适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法,或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
上述样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10~20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20~100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。
根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清,通常需要稀释10~100倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
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假单胞菌胰羧肽B1抗体Human CEP63 酶联免疫试剂盒山羊促卵泡(FSH)免疫试剂盒
蕈状芽孢杆菌维甲结合蛋白2抗体Human CARS (Cysteine–tRNA ligase, cytoplasmic) 酶联免疫试剂盒山羊促甲状腺(TSH)免疫试剂盒
亚钩针孔菌2号染色体开放阅读框80抗体Human CSNK1D(Casein Kinase 1 delta) 酶联免疫试剂盒山羊雌激(E)免疫试剂盒
伍尔链霉菌磷化CD32B抗体Human CCT3 酶联免疫试剂盒山羊雌二(E2)免疫试剂盒
帕氏食氢产水菌过敏C3(补体C3)抗体Human CD1A 酶联免疫试剂盒山羊氧化物歧化2,线粒体(SOD2)免疫试剂盒
雀斑蘑菇癌胚抗原相关粘附分子抗体Human CASP6(Caspase 6) 酶联免疫试剂盒山羊氧化物歧化1,可溶性(SOD1)免疫试剂盒
黑曲霉质多聚腺苷结合蛋白1抗体Human CD209 酶联免疫试剂盒山羊氧化物歧化(SOD)免疫试剂盒
浸麻类芽孢杆菌半胱蛋白抑制剂7抗体Human Cathepsin H 酶联免疫试剂盒山羊补体蛋白4(C4)免疫试剂盒
伯顿毕赤酵母22号染色体开放阅读框29抗体Human CCDC158 (Coiled-coil domain-containing protein 158) 酶联免疫试剂盒山羊补体蛋白3(C3)免疫试剂盒
解烷烃游动微菌神经表面蛋白F3Human CBP20 (NCBP 20 kDa subunit) 酶联免疫试剂盒山羊二(MDA)免疫试剂盒
盘长孢状盘孢组织蛋白C抗体Human CCDC83 酶联免疫试剂盒山羊胞外氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫试剂盒
Microvirga aerophila 半胱蛋白蛋白-4抗体Human CCDC25 (Coiled-coil domain-containing protein 25) 酶联免疫试剂盒山羊白介8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒
玫瑰绿色链霉菌活化半胱蛋白蛋白3抗体Human CCKBR(Gastrin/cholecystokinin type B receptor) 酶联免疫试剂盒山羊白介6(IL-6)免疫试剂盒
魔鬼弧菌7号染色体开放阅读框61抗体Human CCNI2 酶联免疫试剂盒山羊白介4(IL-4)免疫试剂盒
溥硬皮马勃少突胶质跨膜蛋白抗体Human CAMK2D(CaMKII delta) 酶联免疫试剂盒山羊白介2受体(IL-2R)免疫试剂盒
钩状木霉激分子B7-1蛋白抗体Human CaMKIV (Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type IV) 酶联免疫试剂盒山羊白介2(IL-2)免疫试剂盒
地中海马特尔氏菌Martelella│mediterranea 质量规格:>98%,BRPC4,SFRS1互动蛋白1试剂盒邻氧基肉桂
侧柄褐孔菌Fuscoporia│discipes 质量规格:BRP53抗体雷帕霉
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 质量规格:铋含量:>56%,BRP2蛋白抗体试剂盒克班宁
多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒50管/24样PGE2(Human Prostaglandin E2) ELISA Kit 人前列腺suE2规格: 48T
DHT(Human Dihydrotestosterone) ELISA Kit 人双氢睾tong规格: 48T
GHRH(Human growth hormone releasing hormone) ELISA Kit 人促生长激su释放激su规格: 48T
PROG(Human Progesterone) ELISA kit 人孕激su/孕tong规格: 48T
uE3(Human ultra Estriol) ELISA KIT 人敏游离雌三chun规格: 48T