仅供科研实验、不得用于临床
产品名称 |
规格 |
货号 |
磷酸盐-SDS电泳缓冲液 |
500ml |
FS-R7503 |
分类:蛋白电泳
储存条件:室温,12个月
用途:连续SDS凝胶电泳,可以用于蛋白分离
注意事项:主要由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、SDS等组成,4倍稀释后使用。
标准溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,使用浓度为50-1000μg/mL。对于*次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定*筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) *天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养*;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,*将细胞稀释至丰度不过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Aminosalicylic acid 65-49-6 中文名:4-氨基水杨酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
兔6前列腺素F1aelisa试剂盒 兔6前列腺素F1a试剂盒 规格型号:96T/48T 兔6前列腺素F1a试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔6前列腺素F1a试剂盒、兔6前列腺素F1a elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 4-Benzyloxyindole 中文名:4-苄氧基吲哚 分子式:C15H13NO
兔6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 4-Amino-N-methylbenzamide 6274-22-2 中文名:4-氨基-N-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0%
兔6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Aminohippuric acid 61-78-9 中文名:4-氨基马尿酸 分子式:C9H10N2O3 度:98.0%
兔3型胶原 英文名称: Rabbit Collagen Type 3 规格: 48T/96T 英文缩写: C-3 4-Oxododecanedioic acid 中文名: 分子式:C12H20O5 度:95.0%
(S)-4-Methoxydalbergione 中文名:(S)-4-甲氧基黄檀醌 分子式:C16H14O3 度:98.0% 兔乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Dehydroherbarin 中文名: 分子式:C16H14O5 度:96.0% 兔合成酶(NOS)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Herbarin 中文名: 分子式:C16H16O6 度:97.0% 兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Colelomycerone A 中文名: 分子式:C17H18O6 度:98.0% 兔血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Herbaridine B 中文名: 分子式:C17H20O6 度:% 兔胰岛素样生长因子1(rabbit IGF-1) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
磷酸盐-SDS电泳缓冲液rabbitEndothelin1,ET-1ELISAKit兔子内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Acetamidothiazole 2719-23-5 中文名:2-乙酰氨基噻唑 分子式:C5H6N2OS
RabbitEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit兔子内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 20-Hydroxyecdysone 5289-74-7 中文名:20-羟基蜕皮甾酮 分子式:C27H44O7
RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit兔内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 22-Dehydroclerosterol glucoside 143815-99-0 中文名: 分子式:C35H56O6
rabbitEndostatin,ESELISAKit兔子内皮抑素(ES)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2,4-Dihydroxypyridine 中文名: 分子式:C5H5NO2
RabbitDihydrotestosterone,DHTELISAKit兔双氢睾同(DHT)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C13H16FN3O6